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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR胶跑成这样，到底是什么原因呢！
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天地一微尘

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
rosas62: 金币+2, ★★★很有帮助, 很有帮助。谢谢 2014-09-30 09:25:58
2%的胶，100V，24min应该是可以跑出来的。看你图片个人认为最大的可能就是电泳时胶还没有完全凝固，不知道你凝胶时间表是多少，我一般都是提前20分钟左右开始制胶。还有一种可能就是电压不稳定，换一个电泳仪试试。
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11楼2014-09-29 15:24:07
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852634230

新虫 (初入文坛)
胶放的时间太长了，太干了
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今日你对我爱答不理，明天让你高攀不起
12楼2014-09-29 20:50:24
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rosas62

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
13楼2014-09-30 09:26:29
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rosas62

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
14楼2014-09-30 09:29:00
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liuxiuaza

金虫 (正式写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by rosas62 at 2014-09-30 09:29:00
上样量4ul 是TAE...

上样量，不是上样体积，里面DNA的含量是多少？TAE的浓度是多少？如果配胶的TAE和电泳缓冲液TAE不一致，也会出现这种情况
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15楼2014-09-30 12:43:33
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月亮先生

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
rosas62(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-04 22:14:12
如果marker都跑成这个样子，我觉得是你的缓冲液或者胶的问题。如果缓冲液中有使核酸降解的成分，可能会使得电泳条带弥散。当然marker也可能是因为弥散，所以连成一片。
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16楼2014-09-30 15:26:14
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gejiaoyu

铁虫 (初入文坛)
缓冲液影响很大
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老农民
17楼2014-09-30 15:34:11
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biocherry

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by fochao at 2014-09-29 09:46:25
24分钟，是不是有点短？我那时候电压在60-80都是一个两个小时的跑啊！

我们是电压80v，30min就跑开了
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18楼2014-09-30 16:36:50
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-10-04 22:14:21
1.溶胶时间：不要按时间计算，要沸腾了就拿出来，多溶几次，直至完全没有小颗粒。
2.跑胶：90V，35min。时间不要太长，可中途拿出来看看跑到哪了。
3.照胶：调好焦距，你这个好像不清晰，木调好。
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19楼2014-10-01 10:54:05
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Mynameisju

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-04 22:14:33
不是胶没凝好就是EB量少，配好胶最好早一点使用，不要在电泳槽内放置很长时间，EB是会扩散的
楼上说成像仪聚焦也可能
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20楼2014-10-01 15:38:10
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