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舒克的梦想

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于microrna颈环pcr的问题

最近要做mirna不同组织的定量表达,设计了特异的颈环反转录引物和定量的引物,但是现在我搞不懂,定量时选择的内参要怎么扩增,是在用特异反转录引物反转的cdna中扩增么?因为用特异引物反转出来的cdna应该扩增不出来吧,要是分开反转,用总rna一个分用随机引物,一个用特异引物反转,那做定量时候要怎么标定呢?还是反转录的时候,在同一个体系中加两种引物进行反转,然后做定量,内参基因需要另行设计反转录引物么?还请大神指教下呀!

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coffeeice

新虫 (初入文坛)

你好 我也要做miRNA的PCR,我看了关于它的引物设计,看着有点混乱,你能告诉我你怎么设计的吗?谢谢了 907669721@qq.com
2楼2014-10-28 22:17:17
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