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舒克的梦想

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于microrna颈环pcr的问题

最近要做mirna不同组织的定量表达，设计了特异的颈环反转录引物和定量的引物，但是现在我搞不懂，定量时选择的内参要怎么扩增，是在用特异反转录引物反转的cdna中扩增么？因为用特异引物反转出来的cdna应该扩增不出来吧，要是分开反转，用总rna一个分用随机引物，一个用特异引物反转，那做定量时候要怎么标定呢？还是反转录的时候，在同一个体系中加两种引物进行反转，然后做定量，内参基因需要另行设计反转录引物么？还请大神指教下呀！

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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1楼 2014-09-26 17:39:09
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coffeeice

新虫 (初入文坛)
你好 我也要做miRNA的PCR，我看了关于它的引物设计，看着有点混乱，你能告诉我你怎么设计的吗？谢谢了 907669721@qq.com
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2楼2014-10-28 22:17:17
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