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small521

银虫 (小有名气)

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[求助] 质粒转入大肠杆菌中，消失已有6人参与

完整的质粒转入大肠杆菌JM109感受态，然后提质粒，结果无质粒，但是该菌能在含有质粒抗性的平板和液体培养基中生长，有人知道是怎么回事吗？

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1楼 2014-09-25 18:32:17

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采英姿

银虫 (初入文坛)

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专业: 生化分析及生物传感

★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流！ 2014-09-27 10:49:32
gyesang: 回帖置顶 2014-09-27 10:49:34

一是可能你在平板中长的时间太长，长出来的估计就是杂菌了；然后就是考虑抗生素的问题；还有就是你在提取的时候，我不知道你用的是哪一种提取试剂，一般的都是要DNA wash buffer和HBC buffer中加入乙醇或异丙醇，没加的话质粒的溶解度增加，估计就直接洗掉了（我们实验室有人犯过这样的错误）。
个人意见仅供参考！