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small521

银虫 (小有名气)

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[求助] 质粒转入大肠杆菌中，消失已有6人参与

完整的质粒转入大肠杆菌JM109感受态，然后提质粒，结果无质粒，但是该菌能在含有质粒抗性的平板和液体培养基中生长，有人知道是怎么回事吗？

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1楼 2014-09-25 18:32:17

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yunshenglmm

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gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2014-09-27 10:49:05

划线后做菌落PCR，另外摇菌时一定要加抗生素

3楼2014-09-25 22:27:05

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陌路行客

金虫 (小有名气)

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kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-09-25 21:35:19

可能平板中抗生素失效，另外，有的杂菌可以在含有抗生素平板上生长的，还有挑单克隆的时候多挑几个，然后扩增后可以先做个菌液PCR。

人生中的悲剧太多了

2楼2014-09-25 21:30:58

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焃__麟

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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-09-27 10:49:16

两种可能：1 抗生素失效，可以做个对照看看，然后做菌液PCR；2 质粒提取方法或试剂有问题

行到水穷处，坐看云起时

4楼2014-09-25 22:44:50

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好兵德克

新虫 (初入文坛)

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gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2014-09-27 10:49:23

我也觉得可能是抗生素压力小了

5楼2014-09-26 08:59:24

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