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small521

银虫 (小有名气)

[求助] 质粒转入大肠杆菌中,消失 已有6人参与

完整的质粒转入大肠杆菌JM109感受态,然后提质粒,结果无质粒,但是该菌能在含有质粒抗性的平板和液体培养基中生长,有人知道是怎么回事吗?
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yunshenglmm

铜虫 (小有名气)

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gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流! 2014-09-27 10:49:05
划线后做菌落PCR,另外摇菌时一定要加抗生素
3楼2014-09-25 22:27:05
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陌路行客

金虫 (小有名气)

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kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-09-25 21:35:19
可能平板中抗生素失效,另外,有的杂菌可以在含有抗生素平板上生长的,还有挑单克隆的时候多挑几个,然后扩增后可以先做个菌液PCR。
人生中的悲剧太多了
2楼2014-09-25 21:30:58
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焃__麟

铜虫 (初入文坛)

★ ★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-09-27 10:49:16
两种可能:1 抗生素失效,可以做个对照看看,然后做菌液PCR;2 质粒提取方法或试剂有问题
行到水穷处,坐看云起时
4楼2014-09-25 22:44:50
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好兵德克

新虫 (初入文坛)

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gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流! 2014-09-27 10:49:23
我也觉得可能是抗生素压力小了
5楼2014-09-26 08:59:24
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