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馨-馨

银虫 (小有名气)

[求助] 关于染色体歩移技术问题。急!!! 已有1人参与

各位大神,本人想以宏基因组DNA为模板,利用TAKARA公司的Genome Walking Kit 试剂盒,扩增一不完整基因的未知片段,请问这样做能扩增出来吗,效率会低吗?需要的模板DNA量会很多么?
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夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
能不能扩出来看模板情况的,Takara这个试剂盒比较贵,用几次就没了,可以试试TAIL PCR
2楼2014-09-12 12:49:14
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馨-馨

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 夏天的普洱茶 at 2014-09-12 12:49:14
能不能扩出来看模板情况的,Takara这个试剂盒比较贵,用几次就没了,可以试试TAIL PCR

我的模板比较复杂,直接是土壤提取的宏基因组DNA。这个Tail PCR 跟TAKARA 这个试剂盒用的不是相同的方法么?
3楼2014-09-12 14:42:50
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夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 馨-馨 at 2014-09-12 14:42:50
我的模板比较复杂,直接是土壤提取的宏基因组DNA。这个Tail PCR 跟TAKARA 这个试剂盒用的不是相同的方法么?...

原理差不多,都是随机引物+巢式PCR,但是个人感觉TAIL PCR效率比较高。
4楼2014-09-12 16:57:12
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