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喜气洋洋金虫 (初入文坛)
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分步酶切 已有1人参与
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质粒大小为6k多，由于目标片段是3k多一点，酶切位点有三个，第一步用xho1和sac1双酶切，37℃3h，两条片段都是3k多一点，所以需要进行第二步酶切使非目标片段被切成2k加1k的片段。第二步将酶切产物用胶回收试剂盒除去上一步的buffer，然后用sca1和其对应buffer酶切4h，跑电泳结果如图。我测了一下质粒浓度为600多ng/ul，怀疑是不是质粒浓度太高，第二步酶切效率不够。上一次我的酶切效果，三天带大小亮度都比较均匀的，这次重复了两次都是这个效果。请大神给看看，给点经验呀！谢谢 [ 发自手机版 http://muchong.com/3g ] |
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2014-09-11 18:31:36, 7.12 M
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