| 查看: 1659 | 回复: 5 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
a479967958铜虫 (著名写手)
|
[求助]
计数所得藻密度和紫外可见吸光度值不成线性，如何解决?
|
||
|
每天计数、测吸光度各一次，现在得到6对数据，做了一下散点图，毫无头绪，不知道问题出在哪，请懂的人帮忙分析分析，多谢啦~~ 计数：细胞初始密度是2~3*10^4，用血球计数板4*4*25的计数区，每次吹打摇匀细胞悬浊液仍在转动的时候用100uL取样，记录上下两室的计数区细胞总数，剩余悬浊液打回（样品总量是5ml）；样品计数7次，去掉较低和较高异常值，剩下求平均，如此得到细胞密度。计数的原则是左上边压线者计入、团聚体根据可见细胞数，一般计1个，较多时计2个或3个（取一次样，上下两室总共能看到1~2个团聚）。 Abs：按照方法设定(波长、样品重复读数3次)→自动调零→读取样品的常规步骤，先用培养液自动调零，然后换细胞悬浊液，润洗时将培养液倒掉→倒扣吸水→约2ml藻液润洗→倒扣吸水→加藻液→轻轻吹打混匀→立即摁F9测吸光度，每次取样前仍充分混匀。 PS：1、虽说充分混匀，但仍有一小部分细胞团聚在一起，因担心吹打用力过度会破坏细胞，所以允许那一小部分细胞团聚； 2、测吸光度时，第一次测定完毕后，让比色皿在样品池停留一小段时间，吸光度不会改变，表明分散的细胞短时间内不会因为沉降改变吸光度； 3、之前用梯度稀释的方法，一次性测5个浓度的吸光度，做出的标曲线性相关度特别高，接近1（做了3次吧，但是3次的数据合起作图来之后相关性下降了），不过上述测定将波长换成了全波段扫描得到的特征峰波长。 4、假如能够做出相关性>0.9的标准曲线，是不是以后做实验的时候就可以只测吸光度？  因为样品组别设置比较多，而且又有3个平行，一个个数会数死的。。看图的话，计数所得的曲线比较符合常理（适应→对数），而Abs就有点怪，这难道是紫外可见分光光度计不稳定？  话说实验室这台仪器（岛津UV-2401）是有点年份了。。还是那一小部分细胞团聚惹的祸？有点长，烦请不吝指点   散点图V1.png |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 生工检测理论与实务 |
» 猜你喜欢
291求调剂
已经有7人回复
-
300求调剂
已经有8人回复
-
求调剂推荐
已经有7人回复
-
289 分105500药学专硕求调剂(找B区学校)
已经有4人回复
-
0854求调剂
已经有13人回复
-
初试324 中药学 一志愿天中医 求调剂
已经有3人回复
-
药学求调剂
已经有14人回复
-
327求调剂
已经有27人回复
-
急需调剂
已经有5人回复
-
271求调剂
已经有33人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 测吸光度不稳定，一直下降怎么办
已经有3人回复
- 用可见分光光度计测量时，同一浓度下不同体积,结果不一样
已经有25人回复
- 【求助】紫外分光测吸光度不稳定
已经有12人回复
见神一笑
木虫 (著名写手)
- 应助: 39 (小学生)
- 金币: 4301.8
- 散金: 2000
- 红花: 6
- 帖子: 1083
- 在线: 118.3小时
- 虫号: 648935
- 注册: 2008-11-08
- 专业: 生物信息学
6楼2014-09-13 08:40:05
HarveyWang
捐助贵宾 (知名作家)
海外行者
- MicEPI: 15
- 应助: 80 (初中生)
- 金币: 2277.2
- 散金: 24
- 红花: 65
- 帖子: 6880
- 在线: 946小时
- 虫号: 528557
- 注册: 2008-03-19
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
a479967958(dllchina代发): 金币+15, 应楼主要求，鼓励应助 2014-09-10 23:41:00
a479967958(dllchina代发): 金币+15, 应楼主要求，鼓励应助 2014-09-10 23:41:00
|
波长多少? [ 发自小木虫客户端 ] |
2楼2014-09-10 10:20:42
a479967958
铜虫 (著名写手)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 61.1
- 散金: 535
- 红花: 6
- 帖子: 1187
- 在线: 431.4小时
- 虫号: 1574221
- 注册: 2012-01-12
- 性别: MM
- 专业: 环境分析化学
3楼2014-09-10 15:24:34
HarveyWang
捐助贵宾 (知名作家)
海外行者
- MicEPI: 15
- 应助: 80 (初中生)
- 金币: 2277.2
- 散金: 24
- 红花: 65
- 帖子: 6880
- 在线: 946小时
- 虫号: 528557
- 注册: 2008-03-19
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
4楼2014-09-10 16:22:45
5