应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » pcr实验中遇到的问题，求指导
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 1464  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

悠悠飘杨

新虫 (小有名气)

[求助] pcr实验中遇到的问题，求指导 已有3人参与

我的pcr实验每次都要p两次，才能得到想要的结果，请问这会不会对后续的克隆实验有影响？而且我的pcr结果总是不稳定，相同条件下不能得到一样的结果，请问这该怎么办？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-09-04 09:05:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

悠悠飘杨

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 哇哇乱叫 at 2014-09-04 13:55:23
就是引物的特异性太差了，pcr就那几个点容易出问题。大部分就是引物的问题，有时候pcr体系也会有影响，但是你每次读是一样的所以应该不是体系问题。

有一次p出来目的条带了，是做梯度pcr的时候，但是再做就得不到结果了
赞一下 回复此楼
7楼2014-09-04 13:58:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

huyan0817

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
悠悠飘杨(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-09-04 19:31:10
P两次很正常，只要是扩增条带与目标条带差不多，应该问题不大。至于不稳定我不知道楼主所谓的不稳定是指什么情况，可以说详细点！
赞一下 回复此楼
2楼2014-09-04 09:48:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

悠悠飘杨

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by huyan0817 at 2014-09-04 09:48:48
P两次很正常，只要是扩增条带与目标条带差不多，应该问题不大。至于不稳定我不知道楼主所谓的不稳定是指什么情况，可以说详细点！

就是同样的条件，再去做pcr，就得不到一样的结果，条带的位置都不一样，甚至都没有条带，而且杂带的位置也不一样
赞一下 回复此楼
3楼2014-09-04 10:22:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huyan0817

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
悠悠飘杨(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-09-04 19:31:20
引用回帖:
3楼: Originally posted by 悠悠飘杨 at 2014-09-04 10:22:55
就是同样的条件，再去做pcr，就得不到一样的结果，条带的位置都不一样，甚至都没有条带，而且杂带的位置也不一样...

你这个有点奇怪哦!有杂条带说明你引物有非特异性扩增,建议楼主把所有东西换一下,该灭菌的从新灭一次,模板少加点,跑电泳时候用1%胶及电压小点80V，PCR退火温度适当提高几度！
赞一下 回复此楼
4楼2014-09-04 13:22:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 352分-085602-一志愿985 +3 海纳百川Ly 2026-03-29 3/150 2026-03-29 07:15 by 380984326
[考研] 一志愿哈尔滨工业大学材料与化工方向336分 +9 辰沐5211314 2026-03-26 9/450 2026-03-29 01:12 by 我是小康
[考研] 一志愿武汉理工，总分321，英一数二，求老师收留。 +7 nnnnnnn5 2026-03-25 7/350 2026-03-29 00:32 by 我是小康
[考研] 22408 359分调剂 +4 Qshers 2026-03-27 5/250 2026-03-28 21:26 by zhq0425
[考研] 一志愿华理，数一英一285求A区调剂 +8 AZMK 2026-03-25 12/600 2026-03-28 18:15 by AZMK
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-03-27 6/300 2026-03-28 14:10 by 唐沐儿
[考研] 317求调剂 +6 十闲wx 2026-03-24 6/300 2026-03-28 13:27 by Iveryant
[考研] 0703本科郑州大学求调剂 +3 nhj_ 2026-03-25 3/150 2026-03-28 13:24 by Iveryant
[考研] 286求调剂 +12 PolarBear11 2026-03-26 12/600 2026-03-28 12:14 by zllcz
[考研] 291求调剂 +15 hhhhxn.. 2026-03-23 21/1050 2026-03-28 11:26 by self2008
[考研] 308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-25 7/350 2026-03-27 14:47 by 狂炫麦当当
[考研] 085600，材料与化工321分调剂 +4 大馋小子 2026-03-27 6/300 2026-03-27 14:11 by 松花缸1201
[考研] 085602 289分求调剂 +8 WWW西西弗斯 2026-03-24 8/400 2026-03-26 16:33 by 不吃魚的貓
[考研] 085601求调剂总分293英一数二 +4 钢铁大炮 2026-03-24 4/200 2026-03-26 16:28 by dick_runner
[考研] 总分293求调剂 +6 加一一九 2026-03-25 8/400 2026-03-26 13:30 by yujianx
[考研] 一志愿南航 335分 | 0856材料化工 | GPA 4.07 | 有科研经历 +6 cccchenso 2026-03-23 6/300 2026-03-25 22:25 by 544594351
[考研] 284求调剂 +15 Zhao anqi 2026-03-22 15/750 2026-03-25 12:51 by wht0531
[考研] 289材料与化工（085600）B区求调剂 +4 这么名字咋样 2026-03-22 5/250 2026-03-25 08:20 by mx.yue
[考研] 生物学学硕求调剂 +7 小羊睡着了? 2026-03-23 10/500 2026-03-25 02:24 by 清风拂扬。 m
[考研] 336化工调剂 +4 王大坦1 2026-03-23 5/250 2026-03-23 18:32 by allen-yin
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭