应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » pcr实验中遇到的问题，求指导
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 1458  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

悠悠飘杨

新虫 (小有名气)

[求助] pcr实验中遇到的问题，求指导 已有3人参与

我的pcr实验每次都要p两次，才能得到想要的结果，请问这会不会对后续的克隆实验有影响？而且我的pcr结果总是不稳定，相同条件下不能得到一样的结果，请问这该怎么办？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-09-04 09:05:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

悠悠飘杨

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by huyan0817 at 2014-09-04 13:22:33
你这个有点奇怪哦!有杂条带说明你引物有非特异性扩增,建议楼主把所有东西换一下,该灭菌的从新灭一次,模板少加点,跑电泳时候用1%胶及电压小点80V，PCR退火温度适当提高几度！...

我在想会不会是引物的问题，引物的特异性不够好
赞一下 回复此楼
5楼2014-09-04 13:52:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

huyan0817

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
悠悠飘杨(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-09-04 19:31:10
P两次很正常，只要是扩增条带与目标条带差不多，应该问题不大。至于不稳定我不知道楼主所谓的不稳定是指什么情况，可以说详细点！
赞一下 回复此楼
2楼2014-09-04 09:48:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

悠悠飘杨

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by huyan0817 at 2014-09-04 09:48:48
P两次很正常，只要是扩增条带与目标条带差不多，应该问题不大。至于不稳定我不知道楼主所谓的不稳定是指什么情况，可以说详细点！

就是同样的条件，再去做pcr，就得不到一样的结果，条带的位置都不一样，甚至都没有条带，而且杂带的位置也不一样
赞一下 回复此楼
3楼2014-09-04 10:22:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huyan0817

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
悠悠飘杨(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-09-04 19:31:20
引用回帖:
3楼: Originally posted by 悠悠飘杨 at 2014-09-04 10:22:55
就是同样的条件，再去做pcr，就得不到一样的结果，条带的位置都不一样，甚至都没有条带，而且杂带的位置也不一样...

你这个有点奇怪哦!有杂条带说明你引物有非特异性扩增,建议楼主把所有东西换一下,该灭菌的从新灭一次,模板少加点,跑电泳时候用1%胶及电压小点80V，PCR退火温度适当提高几度！
赞一下 回复此楼
4楼2014-09-04 13:22:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 320分，材料与化工专业，求调剂 +4 一定上岸aaa 2026-03-27 4/200 2026-03-27 21:33 by 松花缸1201
[考研] 277跪求调剂 +5 1915668 2026-03-27 8/400 2026-03-27 19:53 by WYUMater
[考研] 295求调剂 +4 1428151015 2026-03-27 5/250 2026-03-27 19:53 by JourneyLucky
[考研] 266分求材料化工冶金矿业等专业的调剂 +4 哇呼哼呼哼 2026-03-26 4/200 2026-03-27 17:02 by zhyzzh
[考研] 材料求调剂 +8 @taotao 2026-03-21 8/400 2026-03-27 11:21 by wangjy2002
[考研] 359求调剂 +4 王了个楠 2026-03-25 4/200 2026-03-27 08:43 by 不吃魚的貓
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-03-26 3/150 2026-03-27 07:58 by chemisry
[考研] 352求调剂 +4 大米饭！ 2026-03-22 4/200 2026-03-26 16:40 by 不吃魚的貓
[考研] 材料科学与工程 317求调剂 +4 JKSOIID 2026-03-26 4/200 2026-03-26 15:58 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿上海交大生物与医药专硕324分，求调剂 +6 jiajunX 2026-03-22 6/300 2026-03-25 23:05 by licg0208
[考研] 334分 一志愿武理-080500 材料求调剂 +4 李李不服输 2026-03-25 4/200 2026-03-25 21:26 by 星空星月
[考研] 各位老师您好：本人初试372分 +5 jj涌77 2026-03-25 6/300 2026-03-25 14:15 by mapenggao
[考研] 上海电力大学材料防护与新材料重点实验室招收调剂研究生（材料、化学、电化学，环境） +4 我爱学电池 2026-03-23 4/200 2026-03-25 00:59 by 1027_324
[有机交流] 有机合成求助 20+3 FENGSHUJEI 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:31 by 88817753
[考博] 26申博自荐 +3 whh869393 2026-03-24 3/150 2026-03-24 09:55 by 21018060
[考研] 一志愿山东大学药学学硕求调剂 +3 开开心心没烦恼 2026-03-23 4/200 2026-03-24 00:06 by 开开心心没烦恼
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境，总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-23 8/400 2026-03-23 20:36 by Creta
[考研] 333求调剂 +3 ALULU4408 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:04 by macy2011
[考研] 一志愿东华大学化学070300，求调剂 +7 2117205181 2026-03-21 8/400 2026-03-22 22:55 by chixmc
[考研] 336求调剂 +5 rmc8866 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:24 by 学员8dgXkO
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭