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舟之行

铜虫 (正式写手)

[求助] 质粒转化到感受态细胞后,涂布到培养基上,没长出菌落,会是哪些环节出错了? 已有2人参与

将质粒转化到感受态细胞后,涂布到含青霉素的培养基上,阴性对照、阳性对照中都没长出菌落,会是哪些环节出错了?备注:都加入了含青霉素的和不含青霉素的培养基中!求指导和解释?
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仿制药一致性评价,多肽及核酸类药物分析及代谢物分析
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xuyunjian

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+3, 鼓励热心应助! 2014-09-03 22:10:55
这个问题可以从多种方面找原因:
可能未转化进去,也可能转化后的细胞已失活。我曾经做过大肠杆菌的质粒转化,在质粒提取和感受态导入过程中,温度的控制和时间的把握很重要,一般都有试剂盒,试剂盒都有详细操作说明。而且,大肠杆菌易受外界噬菌体的裂解,在转化过程中,有些需要无菌,具体,我也遗忘了
相信自己,永不言弃
3楼2014-09-02 22:15:26
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wpwupingwp

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
control vector转一下试试 看是不是感受态细胞的问题
南无观世音菩萨
2楼2014-09-02 21:06:40
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