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xiaolang喵喵

铁虫 (小有名气)

[求助] 峰太宽,怎么改善? 已有5人参与

采用40%甲醇-磷酸盐(PH=3)的流动相等度洗脱,结果4个峰都特别宽(2min),之后采用乙腈-磷酸盐(PH=3)的流动相,梯度洗脱,乙腈的比例都调到15%了,前两个峰苦苦分不开,怎么办?还有什么办法可以改善一下峰形,已经由短柱换过长柱了,没有太大的改善。
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随心而动
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaolang喵喵

铁虫 (小有名气)

谢谢啦
随心而动
2楼2014-09-01 20:09:52
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xiaobai321

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
换根柱子试试,是不是柱校不行了
3楼2014-09-02 09:02:49
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longyi706565

金虫 (正式写手)

因素很多,发个图或给个详细点的色谱条件呗
4楼2014-09-02 09:14:27
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
30%甲醇-10%乙腈磷酸盐(PH=3)的流动相等度洗脱 最好用单泵试试看要好点不?
5楼2014-09-02 12:41:41
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xiaolang喵喵

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by lifucheng at 2014-09-02 12:41:41
30%甲醇-10%乙腈磷酸盐(PH=3)的流动相等度洗脱 最好用单泵试试看要好点不?

好的,我试试
随心而动
6楼2014-09-02 14:23:17
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maysxuer

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1.进样量太大        降低进样溶剂强度使溶质集中
        2.在进样阀中峰分散        在进样前后引入气泡以降低分散
        3.数据采样速率太慢        增加取样频率
        4.检测器时间常数慢        调节时间常数使之与峰宽匹配
        5.流动相粘粘度太高        增加柱温
        6.检测池容积太大         用尽可能小的池体积
不想放弃梦想,努力把现实接近梦想。
7楼2014-09-02 16:08:49
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daisyzhangwei

木虫 (职业作家)

不曾来过……

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
样品的浓度和进样量是多少?保留时间在什么时候?目前分离度有多少?
人生若只如初见...
8楼2014-09-03 10:23:21
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xiaolang喵喵

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by lifucheng at 2014-09-02 12:41:41
30%甲醇-10%乙腈磷酸盐(PH=3)的流动相等度洗脱 最好用单泵试试看要好点不?

采用这个方法后,前面两个峰的分离度是1.3,单个峰的宽度是1min左右
随心而动
9楼2014-09-03 11:36:37
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xiaolang喵喵

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by daisyzhangwei at 2014-09-03 10:23:21
样品的浓度和进样量是多少?保留时间在什么时候?目前分离度有多少?

浓度20μg/ml,进样量10μl,保留时间一个6.0多一个7.0多,分离度1.3
随心而动
10楼2014-09-03 12:06:39
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