应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 一天之内，同一样品进样5针，针针不同，崩溃。求大神解答献计
161/2返回列表12下一页
查看: 2318  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

guoguo306

新虫 (初入文坛)

[求助] 一天之内，同一样品进样5针，针针不同，崩溃。求大神解答献计 已有8人参与

总的来说，就是保留时间逐渐提前，峰宽逐渐变大，见图。 大体的液相条件说一下，柱子是agilent SB-C18柱（色谱柱刚启用不久），流动相是乙腈和0.37%KH2PO4溶液（没有调PH），流速是1.5ml/ml, 用的是梯度洗脱，初始比例是6.5%乙腈。我怀疑是柱效降低造成的，不知道有没有同样遭遇的人，或是哪位大神能够指点迷津。
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2014-08-28 09:00:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

daisyzhangwei

木虫 (职业作家)

不曾来过……

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
guoguo306: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-08-30 10:12:21
首先要排除一下你的色谱方法是不是可靠的
如果是可靠的，排除一下样品是不是不稳定，或者系统会不会是混合或者流速出现问题了，可以换一台仪器重新配样品试试
另外，会不会是每针之间的平衡不够。
如果排除掉这些问题，再考虑色谱柱的问题，从你给的图上看，柱子出问题的可能性不是太大
赞一下(2人) 回复此楼
人生若只如初见...
2楼2014-08-28 09:26:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jixfeng

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
guoguo306: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2014-08-30 10:10:46
guoguo306: 金币+7, ★★★★★最佳答案 2014-08-30 10:12:36
以前用的一直正常？ 那是的柱子不是Agilent SB 的吧？
同意是你的色谱柱效降低所致。6.5%的乙腈，酸性体系SB 柱子耐受根本不行。
曾经走一个拉氧头孢钠 乙酸胺体系（pH 差不多也在4左），5%乙腈梯度体系，也是没几针就这样。

有机相多冲冲，10%-50%-90%-50%-10%-样品流动相，估计就前几针会是正态的峰形。

色谱体系不当，建议换一个其他品牌的C18柱
赞一下(2人) 回复此楼
不要寻找借口
14楼2014-08-28 14:29:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xppcomeon

捐助贵宾 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by xppcomeon at 2014-08-28 09:32:01
看到图了，先问一句流动相混匀了没，第二进样真有气泡没

我有一次是实验员配好流动相忘记摇匀出现了这种情况

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2014-08-28 09:39:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

xppcomeon

捐助贵宾 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
怀疑系统有问题，楼主说说有哪些不同

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
3楼2014-08-28 09:29:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xppcomeon

捐助贵宾 (正式写手)

【答案】应助回帖

看到图了，先问一句流动相混匀了没，第二进样真有气泡没

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
4楼2014-08-28 09:32:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xubang123

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
guoguo306: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-08-30 10:11:54
造成这种原因很多，
1）你多进几针，比如10针，看是否是系统没有平衡好
2）梯度没有走完没有平衡回去，也就是说，你紧跟着的下一针的起始流动相比例是6.5%乙腈，
你先试一试这两种解决方案，如果不行，尝试把A、B相PH调一致，或等度走样。
赞一下 回复此楼
5楼2014-08-28 09:32:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guoguo306

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by daisyzhangwei at 2014-08-28 09:26:31
首先要排除一下你的色谱方法是不是可靠的
如果是可靠的，排除一下样品是不是不稳定，或者系统会不会是混合或者流速出现问题了，可以换一台仪器重新配样品试试
另外，会不会是每针之间的平衡不够。
如果排除掉这些 ...

色谱方法是一直使用的，样品也是稳定的。虽然每针的平衡不一定够，但不同时间进的针是存在保留时间逐渐提前，峰宽逐渐变大这种趋势的。如果是流速出现问题，流速变大，出峰时间提前，但峰宽不至于变大吧。流速变小会出现出峰时间延后。至于混合出问题，我没有仔细研究过，但理论上讲，有机相比例上升，会将出峰时间提前，但峰宽变成这样，实在令人匪夷所思。谢谢你的帮助！
赞一下 回复此楼
7楼2014-08-28 09:50:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

daisyzhangwei

木虫 (职业作家)

不曾来过……
引用回帖:
7楼: Originally posted by guoguo306 at 2014-08-28 09:50:45
色谱方法是一直使用的，样品也是稳定的。虽然每针的平衡不一定够，但不同时间进的针是存在保留时间逐渐提前，峰宽逐渐变大这种趋势的。如果是流速出现问题，流速变大，出峰时间提前，但峰宽不至于变大吧。流速变小 ...

你所说的只是在等度条件下符合，梯度条件更为复杂，流速混合出问题的话，完全有可能会碰到这种情况
赞一下 回复此楼
人生若只如初见...
8楼2014-08-28 09:53:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guoguo306

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by xubang123 at 2014-08-28 09:32:46
造成这种原因很多，
1）你多进几针，比如10针，看是否是系统没有平衡好
2）梯度没有走完没有平衡回去，也就是说，你紧跟着的下一针的起始流动相比例是6.5%乙腈，
你先试一试这两种解决方案，如果不行，尝试把A、 ...

1）5针已经呈现这种趋势，我想足以表明这是个问题了
2）可能某针存在没有平衡好的问题，但至少有几针是相似的，而不是呈现一种趋势。
3）方法本身是药典方法，是不用调PH值的，而且采用等度洗脱不太现实

谢谢你的帮助
赞一下 回复此楼
9楼2014-08-28 09:55:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guoguo306

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by xppcomeon at 2014-08-28 09:32:01
看到图了，先问一句流动相混匀了没，第二进样真有气泡没

流动相分A、B泵采用梯度洗脱，不排除是混样器出问题了。进样应该是没气泡的，即使哪针混入了，也不该一直呈现这种趋势啊
赞一下 回复此楼
10楼2014-08-28 09:59:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 guoguo306 的主题更新
161/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 4FFAWE8HcgUD 2026-08-29 3/150 2026-08-30 20:19 by hZiFeudZyoGR
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 4FFAWE8HcgUD 2026-08-29 3/150 2026-08-30 20:10 by hZiFeudZyoGR
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 3/150 2026-08-30 19:26 by hZiFeudZyoGR
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +5 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 5/250 2026-08-30 18:29 by hZiFeudZyoGR
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 6/300 2026-08-30 18:17 by hZiFeudZyoGR
[考博] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 5/250 2026-08-30 17:56 by hZiFeudZyoGR
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 7/350 2026-08-30 17:45 by hZiFeudZyoGR
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 5/250 2026-08-30 14:03 by GkCVyODlx4mR
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 8/400 2026-08-30 12:03 by l0VvVHGBGRLv
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 4/200 2026-08-30 06:57 by ZPa0EcMwuECS
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 7/350 2026-08-30 06:10 by ZPa0EcMwuECS
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 基金不中，共勉 +11 eulota 2026-08-26 11/550 2026-08-28 14:22 by 火星超人xi
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 基金未中，这种答复是模板吗？ +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 今天务委会开完了，明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 牛来！米来！面来！ +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 某些机构，以效率低为荣，以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭