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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC示差检测器测糖含量
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o360423275

金虫 (小有名气)

[求助] HPLC示差检测器测糖含量 已有4人参与

柱子用的是WATERS XBridge AMIDE，总是在2.8分钟出一个很大的峰，基本上峰面积也是稳定的，求原因。
四分多钟出的那个样品峰（标样）应该不是一种物质吧？分叉是因为同分异构体？
求大神赐教

HPLC示差检测器测糖含量
无标题.gif
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1楼 2014-08-26 17:18:23
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回帖置顶 ( 共有1个 )

o360423275

金虫 (小有名气)
o360423275: 回帖置顶 2014-08-26 18:26:32
引用回帖:
4楼: Originally posted by wyy080214 at 2014-08-26 18:06:03
降低浓度试试...

又跑了个浓度是2.5g/L，还是分叉，而且阿拉伯糖和木糖的分叉峰有重叠，咋回事捏？
追问样品用的是娃哈哈配的，如果走一个娃哈哈的样，还有2.8min的峰。是不是就可以确定是水中的某种物质的峰？
HPLC示差检测器测糖含量-1
阿拉伯糖.gif


HPLC示差检测器测糖含量-2
木糖.png
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5楼2014-08-26 18:24:55
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kf1009

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
2.8min的应该是溶剂峰，建议你的样品用流动相溶解。
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快乐不需要走遍天涯去寻找，只需播一粒种子在脚下。
6楼2014-08-27 08:34:53
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wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
示差检测器为通用性的，固定的峰可能是溶剂峰。另外峰分叉估计是色谱柱的原因，分离异构体的可能性比较小
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2楼2014-08-26 17:46:56
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kf1009

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by o360423275 at 2014-08-27 13:59:20
溶剂峰会影响分析么？样品用水溶解也会出溶剂峰吗？求教...

你去查一查RID检测器的原理，有时候溶剂峰会影响结果。溶解样品的溶剂选的不好，可能会导致溶剂效应致峰变形。
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快乐不需要走遍天涯去寻找，只需播一粒种子在脚下。
8楼2014-08-28 08:31:18
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silence18

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
费姚永芬: 金币+2, 感谢应助交流，欢迎常来分析版 2014-08-29 10:17:43
对于示差检测器，流通池内和参比池内的物质不一样的时候，就会产生色谱峰，有时候甚至会产生倒峰。溶剂峰不和标准峰重叠就可以了，对于色谱峰分叉，可能是进样量过大导致超载， 样品浓度较大，色谱柱损坏，或者分析方法存在问题。
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9楼2014-08-28 10:14:53
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zl1314

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我之前也用RID做过这几个糖。2.8分钟的峰是溶剂峰，峰分叉没遇到过，你换根柱子试试。
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12楼2014-08-30 13:54:32
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普通回帖

o360423275

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wyy080214 at 2014-08-26 17:46:56
示差检测器为通用性的，固定的峰可能是溶剂峰。另外峰分叉估计是色谱柱的原因，分离异构体的可能性比较小

走了个葡萄糖的没有分叉，柱形也挺好……这是木糖的图，求分析。
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3楼2014-08-26 17:49:58
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wyy080214

实习版主 (职业作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by o360423275 at 2014-08-26 17:49:58
走了个葡萄糖的没有分叉，柱形也挺好……这是木糖的图，求分析。...

降低浓度试试
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4楼2014-08-26 18:06:03
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o360423275

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by kf1009 at 2014-08-27 08:34:53
2.8min的应该是溶剂峰，建议你的样品用流动相溶解。

溶剂峰会影响分析么？样品用水溶解也会出溶剂峰吗？求教
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7楼2014-08-27 13:59:20
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o360423275

金虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by silence18 at 2014-08-28 10:14:53
对于示差检测器，流通池内和参比池内的物质不一样的时候，就会产生色谱峰，有时候甚至会产生倒峰。溶剂峰不和标准峰重叠就可以了，对于色谱峰分叉，可能是进样量过大导致超载， 样品浓度较大，色谱柱损坏，或者分析 ...

有没有可能是样品不纯？走了个葡萄糖没有分叉
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10楼2014-08-29 11:10:54
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