24小时热门版块排行榜    

查看: 1700  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

why025

铁虫 (小有名气)

[求助] 同一个基因片段连到两个不同载体,序列就不一样了? 已有3人参与

我从CDNA里P了个基因片段,分别连到两个载体里,测序回来结果一个正确,另一个片段中间插入了一个碱基,我又重测了一次还是这个结果。这什么情况。。有人遇到过么?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

why025

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 尘香驻风 at 2014-08-25 15:44:58
不知道你的基因P出来后有没有纯化或者跑胶鉴定?还有两个载体分别送了多少个去测序呢?一般如果是同一个片段,测序结果应该是一样的。我觉得你这个是P出来两个片段,但因为两个片段只差了一个碱基,没办法分离,导致 ...

我倒是没重新连接,直接重新送的载体。我也想是不是你这种解释,不过这样也太巧了一点。。。
3楼2014-08-25 16:10:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

尘香驻风

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
why025: 金币+4, 有帮助 2014-08-26 12:02:22
不知道你的基因P出来后有没有纯化或者跑胶鉴定?还有两个载体分别送了多少个去测序呢?一般如果是同一个片段,测序结果应该是一样的。我觉得你这个是P出来两个片段,但因为两个片段只差了一个碱基,没办法分离,导致你两个载体刚好分别连了两个片段。你后面重测是直接送连接载体后的产物还是重新连接后再送的呀?
2楼2014-08-25 15:44:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

尘香驻风

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by why025 at 2014-08-25 16:10:29
我倒是没重新连接,直接重新送的载体。我也想是不是你这种解释,不过这样也太巧了一点。。。...

=。=有时候实验就是巧到不行。。。要不你就重新连一个再送测序。。。
4楼2014-08-25 16:21:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaozhibozhi

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
why025: 金币+1, 有帮助 2014-08-26 12:02:42
很正常,PCR就这样,多个碱基、少个碱基、突变个碱基都是常有的事
做一个阳光、开朗的小和尚
5楼2014-08-25 16:41:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见