24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

陈雪123

铁虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 173.5
散金: 6
帖子: 21
在线: 34.1小时
虫号: 1221023
注册: 2011-03-04
性别: MM
专业: 观赏园艺学

[求助] SDS-PAGE后，考染有条带，WB后检测不到目的蛋白。已有5人参与

最近在做WB，目的蛋白大小在21.5 kD。却总是检测不到目的蛋白。可能是因为蛋白浓度太低了。搜了一下，浓缩方法有很多。不知道该选择什么方法？现在有4 mL蛋白。

回复此楼

» 猜你喜欢

Cas 72-43-5需要30g，定制合成，能接单的留言已经有8人回复
求助:我三月中下旬出站，青基依托单位怎么办？已经有6人回复
北京211副教授，35岁，想重新出发，去国外做博后，怎么样？已经有8人回复
磺酰氟产物，毕不了业了！已经有5人回复
论文终于录用啦！满足毕业条件了已经有25人回复
2026年机械制造与材料应用国际会议（ICMMMA 2026）已经有3人回复
自荐读博已经有3人回复
不自信的我已经有5人回复
投稿Elsevier的杂志（返修），总是在选择OA和subscription界面被踢皮球已经有8人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

请问，WB转膜后用考染的原因或者目的是什么？已经有9人回复
SDS-PAGE两条带，Native-PAGE一条带能证明蛋白是纯的吗？已经有7人回复
诱导蛋白表达 SDS-PAGE没有目的条带已经有11人回复
考马斯亮蓝染色后的图片不知如何解释已经有8人回复
SDS-PAGE中蛋白条带位置不一致已经有13人回复
求解：纯化蛋白跑SDS-PAGE，没有条带已经有13人回复
SDS-PAGE凝胶电泳跑出来的条带问题已经有20人回复
SDS-PAGE电泳图这样算成功吗？已经有13人回复
如果分别使用SDS-PAGE和WB方法检测一种10KD蛋白质已经有3人回复
求助！单体蛋白在SDS-PAGE中出现了倍数关系的大条带！已经有8人回复
请问pET30b这个载体在IPTG诱导后有没有可能表达除了目的蛋白以外的其他蛋白？已经有16人回复
SDS-PAGE蛋白电泳同一蛋白不同loading buffer条带不一样已经有7人回复
SDS-Page电泳没有条带，都是黑黑的一片，请教原因已经有9人回复
IPTG诱导后，考染后什么蛋白条带都没有已经有12人回复
请大家帮忙分析下我的SDS-PAGE蛋白检测胶啊已经有26人回复
为什么考马斯亮蓝染色能看到我要的条带，weston却看不到呢？已经有17人回复
SDS-PAGE时分子量差别小于1KD的蛋白质条带，用什么胶才能分开？已经有8人回复
SDS-PAGE电泳，菌液总蛋白，染色后显示的是弥散的已经有5人回复
SDS-PAGE蛋白电泳条带问题已经有7人回复
【求助/交流】SDS-PAGE检测蛋白纯度已经有22人回复

有生之年，做最好的自己，不留遗憾。

1楼 2014-08-25 10:14:05

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

逍潇

铁杆木虫 (著名写手)

应助: 45 (小学生)
金币: 5442.1
散金: 20
红花: 6
帖子: 1137
在线: 385.6小时
虫号: 487765
注册: 2007-12-28
性别: MM
专业: 化学环境污染与健康

引用回帖:

3楼: Originally posted by 陈雪123 at 2014-08-25 12:31:22
蛋白浓度没有测定，20 μL蛋白上样缓冲液加80 μL蛋白煮沸10 min。上样5 μL，也有一次上样10 μL。冷冻干燥的话，俺们没有冷冻干燥器。还有其他办法吗？在不损失蛋白的情况下。...

建议测个蛋白浓度。我没想出除冷冻干燥外还有什么好的办法。下次提蛋白时把细胞多弄点裂解。