24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 3692  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

陈雪123

铁虫 (初入文坛)

[求助] SDS-PAGE后,考染有条带,WB后检测不到目的蛋白。 已有5人参与

最近在做WB,目的蛋白大小在21.5 kD。却总是检测不到目的蛋白。可能是因为蛋白浓度太低了。搜了一下,浓缩方法有很多。不知道该选择什么方法?现在有4 mL蛋白。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

有生之年,做最好的自己,不留遗憾。
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

陈雪123

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 逍潇 at 2014-08-25 12:10:37
考染出来的条带也不一定就是你的目的蛋白。你蛋白浓度是多少?上样多大体积。如果浓缩,用冷冻干燥。

蛋白浓度没有测定,20 μL蛋白上样缓冲液加80 μL蛋白煮沸10 min。上样5 μL,也有一次上样10 μL。冷冻干燥的话,俺们没有冷冻干燥器。还有其他办法吗?在不损失蛋白的情况下。
有生之年,做最好的自己,不留遗憾。
3楼2014-08-25 12:31:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

逍潇

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
考染出来的条带也不一定就是你的目的蛋白。你蛋白浓度是多少?上样多大体积。如果浓缩,用冷冻干燥。
2楼2014-08-25 12:10:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

逍潇

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 陈雪123 at 2014-08-25 12:31:22
蛋白浓度没有测定,20 μL蛋白上样缓冲液加80 μL蛋白煮沸10 min。上样5 μL,也有一次上样10 μL。冷冻干燥的话,俺们没有冷冻干燥器。还有其他办法吗?在不损失蛋白的情况下。...

建议测个蛋白浓度。我没想出除冷冻干燥外还有什么好的办法。下次提蛋白时把细胞多弄点裂解。
4楼2014-08-25 16:52:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ahhngwj

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你确定你目的抗体没有问题么?或者是抗体出问题了,抓不出条带也有可能
5楼2014-08-26 08:43:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 又一批高校组建人工智能学院 师资行吗 不是骗人吗 +6 yexuqing 2026-04-19 7/350 2026-04-23 12:32 by yexuqing
[基金申请] 国自然面上和省基金B类撒花 +18 花田半亩~白 2026-04-21 18/900 2026-04-23 11:31 by 12021227
[考研] 有没有学校收留 +3 蒋昌鹏qtj 2026-04-20 3/150 2026-04-22 20:25 by 学员JpLReM
[考研] 312求调剂 +3 山河似你温柔 2026-04-22 3/150 2026-04-22 20:17 by 学员JpLReM
[考博] 华师大读博 +3 xq83 2026-04-22 5/250 2026-04-22 10:42 by xq83
[论文投稿] 急需审稿人!!! +3 陆小果画大饼 2026-04-21 3/150 2026-04-21 23:54 by jzy_123456
[考博] 申博/考博 +4 啃面包的小书虫 2026-04-17 8/400 2026-04-21 16:26 by 啃面包的小书虫
[考研] 295分求调剂 +6 ?要上岸? 2026-04-17 6/300 2026-04-21 08:18 by Equinoxhua
[考研] 085600材料与化工调剂 5+3 孜孜不倦2002 2026-04-19 6/300 2026-04-20 21:25 by babero
[论文投稿] 有没有接收比较快的sci期刊呀,最好在一个月之内的,研三孩子求毕业 20+4 之护着 2026-04-16 7/350 2026-04-20 15:45 by 豆豆7758
[考研] 337求调剂 +3 jyz04 2026-04-18 3/150 2026-04-20 12:24 by 研可安
[考博] 申博 +3 Xyyx. 2026-04-18 3/150 2026-04-20 10:44 by YuY66
[考博] 湖南大学刘巧玲课题组2026年第二批次博士研究生招生信息 +3 南风观火 2026-04-18 5/250 2026-04-20 10:13 by 南风观火
[考研] 求计算机方向调剂 +3 Toffee2 2026-04-16 6/300 2026-04-19 22:37 by ll叶
[考研] 304求调剂 +8 castLight 2026-04-16 8/400 2026-04-19 17:14 by 中豫男
[考研] 求调剂 +6 苦命人。。。 2026-04-18 7/350 2026-04-19 16:27 by 中豫男
[考研] 接受任何调剂 +6 也就是栗子 2026-04-17 7/350 2026-04-18 17:20 by 涵竹刘
[考研] 260求调剂 +4 Zyt1314520.. 2026-04-17 5/250 2026-04-18 08:28 by babysonlkd
[有机交流] 二苯甲酮酸类衍生物 50+3 小白爱主人 2026-04-17 6/300 2026-04-17 18:47 by kf2781974
[考研] 322求调剂 +6 tekuzu 2026-04-17 6/300 2026-04-17 13:48 by Espannnnnol
信息提示
请填处理意见