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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 染色体步移结果该如何解释？
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wu_chunhui

金虫 (小有名气)

[求助] 染色体步移结果该如何解释？ 已有2人参与

这是我做染色体步移的结果，我是新手，第一次做，结果发现一次PCR的结果很亮而二次三次PCR的结果几乎没有，这是什么原因呢？是PCR原液稀释的原因吗？另外我跑的琼脂糖凝胶电泳图感觉不是很好看，这是什么原因？

染色体步移结果该如何解释？
iocas 2014-08-19 08hr 25min.jpg
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1楼 2014-08-19 08:51:06
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wu_chunhui

金虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by a282398454 at 2014-12-06 09:27:03
请问楼主高退火温度多少啊？用的是哪家公司的产品？小弟也是第一次做这个，结果根本不能用，求指教。

我退火温度按照说明书来的
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11楼2014-12-14 19:24:44
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wu_chunhui

金虫 (小有名气)
样品顺序是Lane1 marker; Lane2-5 SP1 AP1-AP4; Lane6 marker; Lane7-10 SP2 AP1-AP4; Lane11 marker; Lane12-15 SP3 AP1-AP4
赞一下 回复此楼
2楼2014-08-19 08:54:33
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watc1989

新虫 (小有名气)
★ ★
wu_chunhui(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-08-19 20:25:43
引用回帖:
2楼: Originally posted by wu_chunhui at 2014-08-19 08:54:33
样品顺序是Lane1 marker; Lane2-5 SP1 AP1-AP4; Lane6 marker; Lane7-10 SP2 AP1-AP4; Lane11 marker; Lane12-15 SP3 AP1-AP4

不知道你的marker大小，我觉得你的AP3,AP4第2,3轮应该是成功的，因为产物比第一轮大小要小。但是不知道你的sp3离你的序列边界有多远，如果第三轮的产物大小大于sp3到边界的长度，那么可以把第三轮多配几个重复进行切胶回收。胶跑得不好看是不是可以换换电泳缓冲液。。
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3楼2014-08-19 10:07:21
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wu_chunhui

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by watc1989 at 2014-08-19 10:07:21
不知道你的marker大小，我觉得你的AP3,AP4第2,3轮应该是成功的，因为产物比第一轮大小要小。但是不知道你的sp3离你的序列边界有多远，如果第三轮的产物大小大于sp3到边界的长度，那么可以把第三轮多配几个重复进行 ...

非常感谢！
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4楼2014-08-19 18:00:21
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