24小时热门版块排行榜    

查看: 3236  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

lilongping

新虫 (正式写手)

[求助] PCR扩增严重弥散,但是以前用同样方法,条件和试剂都是结果非常好的 已有5人参与

大家看看我这个PCR图片是什么原因呢?
PCR条件是:94° 60s, 52°60s,72° 5min, 扩增循环35圈,用的是3步PCR实验的。这个程序我一直在用,模板是细菌基因组。前一段时间用同样的PCR方法,试剂,模板等等都是一样的,扩增出来了目的条带,实验结果非常好。最近,我想重复这个实验,再做一些回收回来测序用,但是,怎么重复,都是这种严重弥散啊,大家看看这种情况应该怎么办呢?

前后用的PCR条件和试剂都是完全一样的。

两边最边上的3个泳道都是不同大小的DNA分子量标准Marker,他们是清醒可见的。

PCR扩增严重弥散,但是以前用同样方法,条件和试剂都是结果非常好的
2014-08-14  5个12_5扩增失败.jpg
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

核酸生物学实验经验

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

trizol11

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
lilongping(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-08-18 15:50:39
酶量太大,延伸时间短,你修改一下在跑一次试试,
拖带很严重。
任重道远……
4楼2014-08-18 15:21:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

owl2010

金虫 (正式写手)

是不是模板有降解,电泳看一下模板有没有问题。
男人的组成要素:金钱、面子、性、怕死、自恋、吹牛逼。
2楼2014-08-18 12:13:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

vapordw

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
lilongping(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-08-18 15:50:31
既然条件跟试剂都一样,差不多也就是模板有问题了吧
3楼2014-08-18 14:38:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lilongping

新虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by owl2010 at 2014-08-18 12:13:27
是不是模板有降解,电泳看一下模板有没有问题。

新提取的基因组DNA用同样的方法做出来也是这样,严重拖尾啊,我现在都不知道该怎么办呢?
5楼2014-08-18 22:34:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +6 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 8/400 2026-08-31 00:21 by hZiFeudZyoGR
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的? +17 爱看书的可乐 2026-08-26 19/950 2026-08-30 22:24 by xiangy672
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +5 雨打竹帘 2026-08-30 9/450 2026-08-30 22:23 by 余韵清
[基金申请] 能否申诉? +4 echo8914667 2026-08-30 5/250 2026-08-30 21:11 by echo8914667
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 4FFAWE8HcgUD 2026-08-29 5/250 2026-08-30 20:41 by hZiFeudZyoGR
[考博] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 4FFAWE8HcgUD 2026-08-29 4/200 2026-08-30 20:40 by hZiFeudZyoGR
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 4FFAWE8HcgUD 2026-08-29 4/200 2026-08-30 20:30 by hZiFeudZyoGR
[硕博家园] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 5/250 2026-08-30 19:35 by hZiFeudZyoGR
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 4/200 2026-08-30 19:34 by hZiFeudZyoGR
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 4/200 2026-08-30 19:13 by hZiFeudZyoGR
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 4/200 2026-08-30 18:53 by hZiFeudZyoGR
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +5 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 5/250 2026-08-30 18:29 by hZiFeudZyoGR
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[博后之家] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 8/400 2026-08-30 12:03 by l0VvVHGBGRLv
[博后之家] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +8 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 9/450 2026-08-30 11:40 by l0VvVHGBGRLv
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候,我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
信息提示
请填处理意见