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running113木虫 (著名写手)
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[交流]
初生小鼠卵巢石蜡包埋制作的问题，交流交流
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最近一直在做初生小鼠（B6）的卵巢石蜡切片。关于包埋的过程，本人遇到一些问题需要解决，不知坛里大侠们有没有解决办法。 1：初生小鼠卵巢太小，浸酒精、二甲苯，特别是石蜡的过程中容易把卵巢弄丢，不知有何解决办法？ 2：关键步骤中二甲苯的浸泡时间总是拿不准，看很多硕博论文的时间大多在5至10分钟。我在做的时候都控制在1分钟以内，但效果并不是很好。不知哪位大侠给解释一下如何控制时间。 3：最后一步石蜡包埋的时间过长，把卵巢组织从石蜡中取出来放在模中再倒上液态石蜡要持续2至3分钟，组织上原来粘附的石蜡都已冷却，虽然也能切，但总归是影响质量，不知如何解决。 以上是一部分内容，不知大家在制作的过程中还遇到过什么样的棘手问题，一起来讨论一下。 已经快两个月了，实在是快被这个实验弄疯狂了。 下图是成年鼠的（已经是最好的了）。后续制作不理想的图马上奉上，希望大家给予指正。  Frozen 10 4 01.jpg |
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| 我们实验室以前有人做卵巢早衰的，基本上都不做石蜡包埋，极其难做。一半多收集几个，直接做冷冻。石蜡也可以做但是建议你买个好一点的解剖镜，在镜下操作会好一点，不然要弄丢了，我们是做一个微小型包块。二甲苯那一步尽量短一点。另外前面固定用的多聚甲醛最好浓度高一点。酒精脱水最好尽量缩短时间。 |
3楼2014-08-16 22:39:44
running113
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