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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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bswhan

铜虫 (初入文坛)

[求助] 基因组跑胶 已有4人参与

求助我的基因组跑成这样是啥原因啊?之前提的没有问题,近期老是这样,PCR也会出现杂带,望大神帮帮忙,谢谢

基因组跑胶
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bswhan

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by a50044758 at 2014-08-15 15:59:41
一般用的是酚:氯仿:异丙醇为25:24:1(v/v),和提的基因组DNA等体积混合,10000转离心5min,取上清,重复一次,向上清中加入1/10体积的3M pH=5.2的醋酸钠,再加入2.5倍体积纯酒精,-20度冰冻1h,14000r/min冷冻 ...

非常感谢
8楼2014-08-15 18:48:17
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查看全部 17 个回答

a50044758

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
bswhan(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-08-15 13:00:15
基因组不纯,因为你的Marker正常,但是基因组有拖尾,里面的蛋白,多糖没除干净,你把你的基因组用酚仿抽提几遍就好了!

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2014-08-15 01:16:17
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小豆子J

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
bswhan(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-08-15 13:00:26
之前提的没有问题,说明操作上问题不大,那就可能是菌体老化或者提取试剂出了问题,试剂的问题多数会出在菌体裂解部分。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

3楼2014-08-15 08:57:43
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bswhan

铜虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by a50044758 at 2014-08-15 01:16:17
基因组不纯,因为你的Marker正常,但是基因组有拖尾,里面的蛋白,多糖没除干净,你把你的基因组用酚仿抽提几遍就好了!

你好,我是用试剂盒提的基因组,之前的操作都没有换过,你说的酚仿抽提具体的操作,能详细告诉我吗
4楼2014-08-15 10:29:24
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