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蓝默儿金虫 (小有名气)
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[求助]
夹心ELISA方法的建立及酶标单抗 已有6人参与
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本人一直在建定量夹心ELISA方法：双抗体夹心检抗原，但是阴性、空白值很高。阳性OD=1.3,阴性=0.46，先头觉得是封闭液问题，尝试过几种封闭液：脱脂乳，BSA,明胶，马血清。但都没有明显改变。再想是不是本人标记单抗出现问题了， 酶标单抗是用改良的过碘酸钠法将HRP标记到单抗上，我再想是不是酶标单抗溶液中有未结合的游离HRP，在建夹心ELISA方法的过程中，游离的HRP结合到板子上，引起非特异性结合。请做过的前辈给予指点，谢谢 怎样去除游离的HRP，我的酶标抗体有的是用50%的甘油保存的，有的是50微升分装保存的。 |
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