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jiaoxiayoulu

新虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by xzy0425 at 2014-08-12 12:18:20
你细胞破壁厚没有进行其他处理是吧,那你前面的跑得很快的条带就很有可能是宿主菌的DNA。

怎么可能呢,我用提取质粒的试剂盒中的试剂一和试剂二处理了!肯定是质粒条带的!
11楼2014-08-12 14:23:40
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hululu0725

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
菌体电泳总感觉不精确,电泳速度和太多因素有关系了,菌体PCR P目的基因才是正道啊
12楼2014-08-12 15:14:51
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xzy0425

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
11楼: Originally posted by jiaoxiayoulu at 2014-08-12 14:23:40
怎么可能呢,我用提取质粒的试剂盒中的试剂一和试剂二处理了!肯定是质粒条带的!...

那我就不知道了,不好意思
13楼2014-08-12 15:49:15
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jiaoxiayoulu

新虫 (小有名气)

引用回帖:
12楼: Originally posted by hululu0725 at 2014-08-12 15:14:51
菌体电泳总感觉不精确,电泳速度和太多因素有关系了,菌体PCR P目的基因才是正道啊

不会吧!我之前将PCR产物连接T载体,菌体电泳挺好的啊!前面的为连接后的载体,最后是空载体对照
载体构建
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14楼2014-08-12 16:37:24
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Ranen516

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你再换一种方法验证一下!试一试菌PCR!!
15楼2014-08-12 20:12:45
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jiaoxiayoulu

新虫 (小有名气)

引用回帖:
15楼: Originally posted by Ranen516 at 2014-08-12 20:12:45
你再换一种方法验证一下!试一试菌PCR!!

这个当然了,这个是后续要做的!貌似听说假阳性有时候也可以P出目的条带来
16楼2014-08-13 08:36:46
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Ranen516

金虫 (正式写手)

引用回帖:
16楼: Originally posted by jiaoxiayoulu at 2014-08-13 08:36:46
这个当然了,这个是后续要做的!貌似听说假阳性有时候也可以P出目的条带来...

哦!!没遇到过!!
17楼2014-08-13 22:08:54
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chenziping

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
菌落PCR初步鉴定一下,酶切鉴定,然后测序
18楼2014-08-15 00:57:36
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a50044758

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by jiaoxiayoulu at 2014-08-12 10:36:42
将菌液用质粒提取试剂盒的试剂1和试剂11初步破壁后是质粒释放出来,让后直接电泳观察条带是否滞后,初步验证是否有外源片段成功连接上载体!...

谁教你这样做的啊?
你的质粒都没进行酶切,能判断大小吗?你做菌液PCR吧,比你这个简单,靠谱。
19楼2014-08-15 17:10:48
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jiaoxiayoulu

新虫 (小有名气)

引用回帖:
19楼: Originally posted by a50044758 at 2014-08-15 17:10:48
谁教你这样做的啊?
你的质粒都没进行酶切,能判断大小吗?你做菌液PCR吧,比你这个简单,靠谱。...

不会吧,同为超螺旋的质粒,分子量越大同样会滞后的啊!这只是初步判定了
20楼2014-08-18 11:01:29
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