应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 载体构建
202/2返回列表上一页12
查看: 1975  |  回复: 19
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

jiaoxiayoulu

新虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by xzy0425 at 2014-08-12 12:18:20
你细胞破壁厚没有进行其他处理是吧，那你前面的跑得很快的条带就很有可能是宿主菌的DNA。

怎么可能呢，我用提取质粒的试剂盒中的试剂一和试剂二处理了！肯定是质粒条带的！
赞一下 回复此楼
11楼2014-08-12 14:23:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hululu0725

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
菌体电泳总感觉不精确，电泳速度和太多因素有关系了，菌体PCR P目的基因才是正道啊
赞一下 回复此楼
12楼2014-08-12 15:14:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xzy0425

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
11楼: Originally posted by jiaoxiayoulu at 2014-08-12 14:23:40
怎么可能呢，我用提取质粒的试剂盒中的试剂一和试剂二处理了！肯定是质粒条带的！...

那我就不知道了，不好意思
赞一下 回复此楼
13楼2014-08-12 15:49:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiaoxiayoulu

新虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by hululu0725 at 2014-08-12 15:14:51
菌体电泳总感觉不精确，电泳速度和太多因素有关系了，菌体PCR P目的基因才是正道啊

不会吧！我之前将PCR产物连接T载体，菌体电泳挺好的啊！前面的为连接后的载体，最后是空载体对照
载体构建
_II)6R{}93{CJ_K8K(X[CJN.jpg
赞一下 回复此楼
14楼2014-08-12 16:37:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Ranen516

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你再换一种方法验证一下！试一试菌PCR！！
赞一下 回复此楼
15楼2014-08-12 20:12:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiaoxiayoulu

新虫 (小有名气)
引用回帖:
15楼: Originally posted by Ranen516 at 2014-08-12 20:12:45
你再换一种方法验证一下！试一试菌PCR！！

这个当然了，这个是后续要做的！貌似听说假阳性有时候也可以P出目的条带来
赞一下 回复此楼
16楼2014-08-13 08:36:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Ranen516

金虫 (正式写手)
引用回帖:
16楼: Originally posted by jiaoxiayoulu at 2014-08-13 08:36:46
这个当然了，这个是后续要做的！貌似听说假阳性有时候也可以P出目的条带来...

哦！！没遇到过！！
回复此楼
17楼2014-08-13 22:08:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenziping

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
菌落PCR初步鉴定一下，酶切鉴定，然后测序
赞一下 回复此楼
18楼2014-08-15 00:57:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a50044758

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by jiaoxiayoulu at 2014-08-12 10:36:42
将菌液用质粒提取试剂盒的试剂1和试剂11初步破壁后是质粒释放出来，让后直接电泳观察条带是否滞后，初步验证是否有外源片段成功连接上载体！...

谁教你这样做的啊？
你的质粒都没进行酶切，能判断大小吗？你做菌液PCR吧，比你这个简单，靠谱。
赞一下 回复此楼
19楼2014-08-15 17:10:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiaoxiayoulu

新虫 (小有名气)
引用回帖:
19楼: Originally posted by a50044758 at 2014-08-15 17:10:48
谁教你这样做的啊？
你的质粒都没进行酶切，能判断大小吗？你做菌液PCR吧，比你这个简单，靠谱。...

不会吧，同为超螺旋的质粒，分子量越大同样会滞后的啊！这只是初步判定了
赞一下 回复此楼
20楼2014-08-18 11:01:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 jiaoxiayoulu 的主题更新
202/2返回列表上一页12
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +10 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 22/1100 2026-11-06 17:18 by 5sJFDKp2kwuI
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 7/350 2026-11-06 16:43 by 5sJFDKp2kwuI
[考博] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +6 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 8/400 2026-11-06 16:34 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 11/550 2026-11-06 16:32 by 5sJFDKp2kwuI
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 10/500 2026-11-06 16:23 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 16:12 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 15/750 2026-11-06 13:49 by BkA9Bi5cMhkD
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 17/850 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 14/700 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 10/500 2026-11-06 12:32 by BkA9Bi5cMhkD
[考研] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 14/700 2026-11-06 05:11 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 kvewwGtKktqB 2026-11-04 11/550 2026-11-06 05:10 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 kvewwGtKktqB 2026-11-04 16/800 2026-11-06 05:00 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 22/1100 2026-11-06 04:47 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 04:47 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 8/400 2026-11-06 02:24 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 7/350 2026-11-06 02:13 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 hNpp4Y2CGvSC 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:53 by qL1cU46YIdK0
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-05 11:10 by PYZmcHr5kSaq
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭