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请问做PAGE电泳MARKER总是跑不开,不知道为什么,请高手指教
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xingrui314
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请问做PAGE电泳MARKER总是跑不开,不知道为什么,请高手指教
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请问做PAGE电泳MARKER最上面的两条总是跑不开,今天做了一板SDS胶结果连Marker都看不到条带,不知道为什么,请高手指教,因为这个已经重复做了好多次了,结果还是一样,都不知道该怎么办?谢谢啦。
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1楼
2014-08-11 19:19:37
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xingrui314
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2楼
:
Originally posted by
ssssllllnnnn
at 2014-08-11 21:18:47
提供的信息太少,无从判断。
你的胶是自己配的还是pre-casted(买来现成的)?浓度是多少?梯度胶?running buffer?新鲜还是用过多次了? Marker是什么?最大的有多大?
重复性这么好说明你某个环节出了问题,暂 ...
恩,谢谢。我的胶都是自己配的,后来SDS的marker出来了,就是PAGE的还是分不开,12%分离胶,5%浓缩胶,Marker最大是116KDa
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5楼
2014-08-25 15:50:38
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ssssllllnnnn
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xingrui314: 金币+3,
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2014-08-25 15:57:13
提供的信息太少,无从判断。
你的胶是自己配的还是pre-casted(买来现成的)?浓度是多少?梯度胶?running buffer?新鲜还是用过多次了? Marker是什么?最大的有多大?
重复性这么好说明你某个环节出了问题,暂时不要重复了,逐个排除一下(每次改变一个条件)看看。
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2楼
2014-08-11 21:18:47
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2014-08-13 21:30:10
xingrui314: 金币+2
2014-08-25 15:57:36
你的分离胶浓度是多少?跑胶的电压(电流)是多少?跑多长时间?电泳液的配方?是否新配?以上都会影响SDS-PAGE中蛋白的涌动。一般分离胶的浓度小(8% or 10%),电压120V 2h,新配的电泳液,只要marker本身没用质量问题,都能跑出来的。
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不偷懒,不拖拉
3楼
2014-08-11 23:00:26
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pengchenping
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2014-08-13 21:30:14
xingrui314: 金币+2
2014-08-25 15:57:55
可能是你的胶浓度太大,分子量大的条带分不开也是可能的。我跑过15%的胶,245kd的分的开。不知你是啥情况,或者发个图
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4楼
2014-08-13 14:55:39
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