应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 蓝白斑筛选挑取白色克隆用菌落PCR验证，除目的片段外还有一条带，什么原因？
51/1返回列表
查看: 3427  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

贤愚Libra

银虫 (正式写手)

[求助] 蓝白斑筛选挑取白色克隆用菌落PCR验证，除目的片段外还有一条带，什么原因？ 已有3人参与

如题，引物T7/SP6，目的片段大小为450bp。

蓝白斑筛选挑取白色克隆用菌落PCR验证，除目的片段外还有一条带，什么原因？
T7-SP6.jpg
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

核酸生物学实验经验

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
www------sr-------------
1楼 2014-08-10 09:37:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

贤愚Libra

银虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by zhaodahe at 2014-08-10 10:03:37
我们也用你这种marker，看上去确实目的条带太弱了，反而700多的条带很亮。不知道你连接的片段多大，是不是连了两个进去？另外，电泳图上半部分很亮，不知道是不是紫外光没照均匀？
...

不是的，上面亮的是我的目的片段（目的片段加载体部分序列），下面弱的是杂带。胶上部分亮可能是因为我将染料加到胶里的原因。
赞一下 回复此楼
www------sr-------------
6楼2014-08-10 12:15:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

Translator and Proofreader

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
贤愚Libra(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-08-10 10:28:56
虽然不知道你的marker的大小，但感觉你的扩增产物可能不是你的target，也许是些非特异性扩增？特别许多产物大小还不一致？是不是这两个引物配对不是太好还是扩增条件未优化？有无阳性对照？（两个引物不会是同方向的 吧？）
赞一下 回复此楼
2楼2014-08-10 09:48:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

贤愚Libra

银虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ssssllllnnnn at 2014-08-10 09:48:46
虽然不知道你的marker的大小，但感觉你的扩增产物可能不是你的target，也许是些非特异性扩增？特别许多产物大小还不一致？是不是这两个引物配对不是太好还是扩增条件未优化？有无阳性对照？（两个引物不会是同方向的 ...

T7/SP6是T载体上的通用引物，应该不是引物的问题，我的marker是100bp的marker,最上面是1500，往下以此是1000bp,900bp,800bp……，上面的600-700bp间的带是我的目的片段，下面400-500bp间的带是不该出现的带。
赞一下 回复此楼
www------sr-------------
3楼2014-08-10 10:01:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaodahe

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
贤愚Libra(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-08-10 10:29:08
我们也用你这种marker，看上去确实目的条带太弱了，反而700多的条带很亮。不知道你连接的片段多大，是不是连了两个进去？另外，电泳图上半部分很亮，不知道是不是紫外光没照均匀？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2014-08-10 10:03:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭