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求知者001

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[求助] 高效液相样品出不来峰是怎么回事? 已有10人参与

我测的是水样中的抗生素,用高效液相+紫外检测器。流动相为A乙腈,B0.01M草酸。
图中依次为(上)标样,(中)300mL水样浓缩600倍,(下)500mL水样浓缩1000倍的高效液相色谱图,600倍与1000倍都没有出峰,且图形相近,请问我这是什么问题?是没有洗脱下来?还是淋洗的时候把样品淋洗掉了?可是我看文献还有用5%的甲醇淋洗,甚至还有用纯甲醇淋洗的呀...
PS:我的前处理是固相萃取,用的Waters Oasis小柱。按照文献的方法,用5ml甲醇、5ml水(pH=4)活化。进样后,先用2mL2%甲醇淋洗,抽真空干燥5分钟左右,再用2×5ml甲醇洗脱。

高效液相样品出不来峰是怎么回事?
标样+600倍+1000倍.JPG
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chyy

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
stormxuhao: 金币+1, 积极回复 2014-08-12 08:54:53
个人觉得是是浓度太低,紫外检测器灵敏度不高。可以水样样品中加点标样,测一下整个方法的加标回收率确认一下。
17楼2014-08-11 15:09:11
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任长存

禁虫 (正式写手)

Environment Protecting

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
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求知者001: 金币+15, ★★★很有帮助, 3Q 2014-08-08 22:48:52
stormxuhao: 金币+1, 积极回复 2014-08-12 08:54:03
后两个基本属于基线漂移了吧,目测是你测的样品中抗生素浓度太少。减少稀释倍数  试试看
2楼2014-08-08 20:16:12
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liwentao2010

荣誉版主 (文坛精英)

山涛

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
求知者001: 金币+15, ★★★很有帮助, 3Q 2014-08-08 22:49:03
stormxuhao: 金币+1, 积极回复 2014-08-12 08:54:12
浓度低或者有干扰物质,前者可以借用UPLC测定
加油!
3楼2014-08-08 21:24:13
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求知者001

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引用回帖:
2楼: Originally posted by 任长存 at 2014-08-08 20:16:12
后两个基本属于基线漂移了吧,目测是你测的样品中抗生素浓度太少。减少稀释倍数  试试看

你看一下样品的两个图,纵坐标很小。我是浓缩的样品,浓缩了1000倍仍不见有峰出现,之前看文献,通常浓缩500-1000倍就能够测的出啊,为什么我这个一点峰都木有
人生最曼妙的风景,是内心的淡定与从容。
4楼2014-08-08 22:05:40
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