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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 分析前沿 » [求助]C18反相色谱柱反冲的具体步骤！
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21007026

铁虫 (小有名气)

[求助] [求助]C18反相色谱柱反冲的具体步骤！ 已有5人参与

柱子最近有点脏，标准品出峰全分叉，正常的95:5的甲醇水溶液冲洗2天，没有什么效果，打算拆下来反冲柱子试试。本人是液相菜鸟，对如何拆洗一窍不通，请教有过经验的前辈教一下：拆洗柱子的具体步骤。
还有几个小问题：需要在拆柱子前将柱子填满甲醇是吧？
     反冲时液体不能流经检测器是吧？如何控制呢？
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1楼 2014-08-04 17:34:46
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21007026

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by zzxiong at 2014-08-04 22:52:51
由于色谱柱内的填料有序，反冲时，如果流速还是与正常使用一样大，很可能使填料压向进口一端，在柱的另一端出现空隙。严重影响柱的性能。因此，把柱拆下后，反方向连接，让流动相从柱出口一端流入柱，流速尽可能小 ...

我曾用甲醇水95:5正常冲洗2天，但没有效果。反相能好些吗？加入四氢呋喃有什么作用呢？
反冲时，紫外检测器需要关吗？
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6楼2014-08-05 11:28:50
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wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
21007026: 金币+5, ★有帮助, 我之前曾用甲醇低流速0.2ml冲了一夜，但效果不大。 2014-08-05 11:24:51
尽量不要反冲，反冲是没有办法时的办法，试着使用异丙醇，然后低流速冲洗，然后再换成乙腈，低流速冲洗，再换成甲醇，低流速冲洗。试试吧
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2楼2014-08-04 20:57:18
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zzxiong

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wyy080214 at 2014-08-04 20:57:18
尽量不要反冲，反冲是没有办法时的办法，试着使用异丙醇，然后低流速冲洗，然后再换成乙腈，低流速冲洗，再换成甲醇，低流速冲洗。试试吧

由于色谱柱内的填料有序，反冲时，如果流速还是与正常使用一样大，很可能使填料压向进口一端，在柱的另一端出现空隙。严重影响柱的性能。因此，把柱拆下后，反方向连接，让流动相从柱出口一端流入柱，流速尽可能小。
使用甲醇水不一定能冲洗干净，可在流动相中加入一定比例的四氢呋喃。
如果冲洗后还是效果不佳，应考虑是否无机物的污染，改用离子对试剂冲洗。
  柱冲洗后，用冲洗流动相，再用甲醇封柱。
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3楼2014-08-04 22:52:51
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zzxiong

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wyy080214 at 2014-08-04 20:57:18
尽量不要反冲，反冲是没有办法时的办法，试着使用异丙醇，然后低流速冲洗，然后再换成乙腈，低流速冲洗，再换成甲醇，低流速冲洗。试试吧

反冲时，一般可以流经检测器，不像离子色谱那样可能会影响检测。如果可能的话，不经过检测器，直接从废液管排出。
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4楼2014-08-04 22:57:41
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