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21007026

铁虫 (小有名气)

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[求助] [求助]C18反相色谱柱反冲的具体步骤！已有5人参与

柱子最近有点脏，标准品出峰全分叉，正常的95:5的甲醇水溶液冲洗2天，没有什么效果，打算拆下来反冲柱子试试。本人是液相菜鸟，对如何拆洗一窍不通，请教有过经验的前辈教一下：拆洗柱子的具体步骤。
还有几个小问题：需要在拆柱子前将柱子填满甲醇是吧？
反冲时液体不能流经检测器是吧？如何控制呢？

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1楼 2014-08-04 17:34:46

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zzxiong

木虫 (小有名气)

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引用回帖:

2楼: Originally posted by wyy080214 at 2014-08-04 20:57:18
尽量不要反冲，反冲是没有办法时的办法，试着使用异丙醇，然后低流速冲洗，然后再换成乙腈，低流速冲洗，再换成甲醇，低流速冲洗。试试吧

由于色谱柱内的填料有序，反冲时，如果流速还是与正常使用一样大，很可能使填料压向进口一端，在柱的另一端出现空隙。严重影响柱的性能。因此，把柱拆下后，反方向连接，让流动相从柱出口一端流入柱，流速尽可能小。
使用甲醇水不一定能冲洗干净，可在流动相中加入一定比例的四氢呋喃。
如果冲洗后还是效果不佳，应考虑是否无机物的污染，改用离子对试剂冲洗。
柱冲洗后，用冲洗流动相，再用甲醇封柱。