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zoeye

金虫 (小有名气)

[求助] 知道亚种如何找现成的16S rRNA鉴定引物? 已有2人参与

各位前辈
我想用PCR的方法鉴定某一特定的微生物亚型
有什么数据库能找到现成的引物吗?

或者通用引物要怎么找?
是不同的可变区引物不同?
如果我之前用V4-V5可变区的通用引物 并不能区分这几个微生物
换可变区的引物有用吗?

谢谢
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zoeye

金虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 499649610 at 2014-08-06 11:57:58
16S 应该很能区分到亚种水平,甚至很多微生物种水平都难,而且很多微生物都发现不只存在一个16s rRNA,如果微生物不可培养,又图省事的话,做MLSA吧

感谢您的回复

做MLSA的前提是不是必须分离出单一菌落再进行PCR鉴定?
我现在是已知自己关注的菌是什么
要在混合样本里面找出我关注的菌 也可以做MLSA吗?
MLSA是结合多个保守基因进行PCR对吧
既然是保守基因 那混合样本里的每个菌不都能P出来吗?
8楼2014-08-06 16:39:47
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zhaozhibozhi

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
刚回答了你一个问题。。。

现成引物啊,最好找paper,数据库记得有个Q-bank(欧洲的)。

16s序列全长的或者可变区的通用引物显然极难区分不同细菌的,毕竟是通用的。
有差异才能区分。
做一个阳光、开朗的小和尚
2楼2014-08-05 08:45:03
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zoeye

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhaozhibozhi at 2014-08-05 08:45:03
刚回答了你一个问题。。。

现成引物啊,最好找paper,数据库记得有个Q-bank(欧洲的)。

16s序列全长的或者可变区的通用引物显然极难区分不同细菌的,毕竟是通用的。
有差异才能区分。

我刚搜了 Q-bank貌似是做植物的
我的菌都是人口腔中的
并且我想知道 我发现的微生物也许不是新的 但是之前都没有人在口腔里报道过 这个能不能算一个新发现呢
并且 我怎么判断这个菌到底是有益还是有害的呢
3楼2014-08-05 09:07:28
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zhaozhibozhi

金虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zoeye at 2014-08-05 09:07:28
我刚搜了 Q-bank貌似是做植物的
我的菌都是人口腔中的
并且我想知道 我发现的微生物也许不是新的 但是之前都没有人在口腔里报道过 这个能不能算一个新发现呢
并且 我怎么判断这个菌到底是有益还是有害的呢...

你是要做微生物鉴定?

可以16S序列+形态、生理生化指标+其它证据(很多类型,但必不可少)。如果是新种,一般要做DNA-DNA杂交(有人只做了MLSA);当然全基因组测序也可以啊。

记得美国有个微生物组计划,通过高通量测序检测人体各个部位的微生物构成,文章发了一大批了。你确定没有人报道过?

至于有益有害,你们做药理的更清楚怎么做啊。
做一个阳光、开朗的小和尚
4楼2014-08-05 09:55:11
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