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质粒提取问题，都快1个月了，求解决了啊？已有4人参与
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将别人给的质粒 （不知道抗性、序列，只知道里面有我需要的目的基因片段。抗性的确定我是分别把转化的感受态细胞分别涂到含有A、C、K的平板上，结果A和K的板子长了，然后转点到A+K的平板上，也长了，提取质粒。）导入DH5@中进行扩展，然后用质粒提取试剂盒提取质粒（试剂盒没有问题，实验室别人都能正常提取出来），浓度大概在100ng/ul左右。 下一步就是验证，将别人给的质粒和自己提取的质粒进行电泳验证，结果如下： 分析：明显我提取出来的质粒和别人给的质粒结果差别很大 我的问题：是否这个质粒不适宜DH5@菌株里面扩增，还有最上面的条带是什么？基因组？RNA？为什么我把纯质粒导进去，提出来成这样了，按理说质粒的转化效率还是很高的啊。 为了进一步验证我接下来有了单酶切3h两个质粒，跑胶，结果如下： marker后Lane1:别人的质粒单酶切结果 Lane2：自己的质粒酶切 综上：我的困惑时怎么样扩增别人的质粒，样品越来越少了，都快1个月，各种纠结啊，有没有大神也遇到这样的问题，求解决啊，金币多多的？  质粒跑胶图  酶切结果图 |
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xy656691
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