| 查看: 1703 | 回复: 7 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
质粒提取问题，都快1个月了，求解决了啊？已有4人参与
|
||
|
将别人给的质粒 （不知道抗性、序列，只知道里面有我需要的目的基因片段。抗性的确定我是分别把转化的感受态细胞分别涂到含有A、C、K的平板上，结果A和K的板子长了，然后转点到A+K的平板上，也长了，提取质粒。）导入DH5@中进行扩展，然后用质粒提取试剂盒提取质粒（试剂盒没有问题，实验室别人都能正常提取出来），浓度大概在100ng/ul左右。 下一步就是验证，将别人给的质粒和自己提取的质粒进行电泳验证，结果如下： 分析：明显我提取出来的质粒和别人给的质粒结果差别很大 我的问题：是否这个质粒不适宜DH5@菌株里面扩增，还有最上面的条带是什么？基因组？RNA？为什么我把纯质粒导进去，提出来成这样了，按理说质粒的转化效率还是很高的啊。 为了进一步验证我接下来有了单酶切3h两个质粒，跑胶，结果如下： marker后Lane1:别人的质粒单酶切结果 Lane2：自己的质粒酶切 综上：我的困惑时怎么样扩增别人的质粒，样品越来越少了，都快1个月，各种纠结啊，有没有大神也遇到这样的问题，求解决啊，金币多多的？  质粒跑胶图  酶切结果图 |
回复此楼» 猜你喜欢
为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种?
已经有5人回复
-
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》
已经有3人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有212人回复
-
求助 食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社 电子版
已经有5人回复
-
胶体几丁质的结晶度？
已经有0人回复
-
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士
已经有2人回复
-
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线
已经有5人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
xy656691
金虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 37 (小学生)
- 贵宾: 0.248
- 金币: 1404.8
- 散金: 772
- 红花: 12
- 帖子: 751
- 在线: 158.2小时
- 虫号: 1681902
- 注册: 2012-03-11
- 性别: GG
- 专业: 免疫学研究新技术与新方法
4楼2014-07-30 16:23:17