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xiaxuele8213

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于CCK-8结果异常,向各位大神求助已有2人参与

本人应用药物干扰后测定肺腺癌细胞系A549、PC-9对于顺铂的药物敏感性,多次铺板实验,结果让人难以理解,PC-9对顺铂的浓度变化趋势明显,无明显异常.
A549多次实验,最高浓度为1000umol/L(0.3mg/ML),加入CCK-8后发现最高浓度顺铂组抑制率为10~17%,根据既往文献,这个IC50也就是几十uM,这个真是太奇怪了,但是镜下看还是有变化的,细胞形态改变,没有了梭形外观,细胞数减少(图一),对照组正常(图二),可是为什么OD值没有趋势呢,难道这个细胞系是超级耐药????
A549铺板密度为5000(8000也试过),铺板后24小时贴壁后,加入梯度的顺铂处理,24小时(48小时及72小时也试过)后加入10%体积的CCK-8,1-4小时测量OD值
求大神帮忙分析原因,求解决办法,不胜感激,因为小弟没有积分,所以没办法拿很多分给大家,希望大神帮忙!!!!

关于CCK-8结果异常,向各位大神求助
实验组.jpg


关于CCK-8结果异常,向各位大神求助-1
对照组.jpg
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xiaxuele8213

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 华农夏田 at 2014-07-24 20:08:21
实验组细胞飘了,怎么那么少的细胞?OD450应该有明显变化,请每次处理之前镜检细胞状态,结果会好的。

已经多次进行实验,除了DDP,还测过培美曲塞,PC-9都有趋势,A549就是这么神奇,OD值(DDP浓度最大的)较对照组差异很小,真是搞不懂,急的要死呀
3楼2014-07-24 20:23:35
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华农夏田

铁虫 (正式写手)

实验组细胞飘了,怎么那么少的细胞?OD450应该有明显变化,请每次处理之前镜检细胞状态,结果会好的。
要科研也要生活
2楼2014-07-24 20:08:21
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风信子寻梦

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
请确认实验组和对照组的细胞个数状态一样!
4楼2014-07-24 20:41:41
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xiaxuele8213

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 风信子寻梦 at 2014-07-24 20:41:41
请确认实验组和对照组的细胞个数状态一样!

铺板后镜下观察细胞个数及状态没有明显差异
5楼2014-07-24 20:49:32
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