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菌液pcr,坐等求助
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hajierlove
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[
求助
]
菌液pcr,坐等求助
已有7人参与
今天做的菌液pcr,三个基因挑了48个单克隆,做菌液pcr,引物是M13通用引物,出来的目的条带都是250bp。750bp。目的片段是500bp。怎么回事?只能证明没有连接上吗?
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踏实
1楼
2014-07-23 20:33:08
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hajierlove
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4楼
:
Originally posted by
stone2239
at 2014-07-23 22:23:16
做阴性对照了吗?用的是什么T载体?查下通用引物之间的距离。
应该是连接转化成功了,M13通用引物扩增空载体的产物大小一般是200bp左右。这样加上你的目的片段大小应该就是对的。
150bp左右
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踏实
19楼
2014-07-24 22:19:01
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lijianfu12
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专业: 植物生理与生化
你用自己的引物跑p呀!干嘛用m13
[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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好好搞学术
2楼
2014-07-23 21:26:20
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hajierlove(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流
2014-07-24 09:31:32
引物特异性不行啊,建议自己根据目的条带设计会更靠谱一些
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小虫虫~~
3楼
2014-07-23 21:40:31
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stone2239
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西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流
2014-07-24 09:31:40
做阴性对照了吗?用的是什么T载体?查下通用引物之间的距离。
应该是连接转化成功了,M13通用引物扩增空载体的产物大小一般是200bp左右。这样加上你的目的片段大小应该就是对的。
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4楼
2014-07-23 22:23:16
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