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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 菌液pcr有结果，酶切没有，一定是假阳性吗？
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hajierlove

铜虫 (正式写手)

[求助] 菌液pcr有结果，酶切没有，一定是假阳性吗？ 已有7人参与

菌液pcr有亮亮的目的条带（用的M13通用引物），提质粒，浓度100左右，酶切过夜，没有目的条带，一定是假阳性吗？若送出去测序，是不是有点浪费？
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踏实
1楼 2014-07-23 15:16:58
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hajierlove

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 胡亚梅 at 2014-07-23 21:42:32
不一定啊，有可能是酶切没有切好，可以直接测序，现在测序也不贵，我之前有测序真确，但是酶切死活切不下来的情况

害怕是酶切的问题，我做了两次酶切，都没有东西。

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踏实
9楼2014-07-24 03:49:22
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geshujuan

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
hajierlove(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-07-24 09:33:53
换新的电泳缓冲液，我之前也遇到过这种情况，换过电泳缓冲液就可以跑出带了！祝你实验顺利！
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我一定可以做的更好！！
2楼2014-07-23 16:59:01
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hajierlove

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by geshujuan at 2014-07-23 16:59:01
换新的电泳缓冲液，我之前也遇到过这种情况，换过电泳缓冲液就可以跑出带了！祝你实验顺利！

嗯嗯，好的，我试试

[ 发自小木虫客户端 ]
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踏实
3楼2014-07-23 17:25:33
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luwei13566

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
hajierlove(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-07-24 09:34:04
菌落PCR既然有非常特异的亮带，扩增条带大小和你的理论值一致的话就直接测序吧
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大家相互帮助哈
4楼2014-07-23 19:21:43
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