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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于启动子
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金辉_萍

金虫 (小有名气)
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4楼: Originally posted by younghe at 2014-07-21 16:21:19
启动子是比较难扩的，多设计几对引物，用GC buffer扩增

是反映体系的问题啊 我p了20来次昨晚上p出来了谢谢大家 万分感谢
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爱拼才会赢
11楼2014-07-22 21:28:01
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金辉_萍

金虫 (小有名气)
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5楼: Originally posted by primer022 at 2014-07-21 16:51:10
别pcr了，去全基因合成吧，也不贵，1ooo多吧。直接把你需要的片段克隆到载体上，当然你可以前后加上你需要的酶切位点

是反映体系的问题啊 我p了20来次昨晚上p出来了谢谢大家 万分感谢
想法是好的  不过老板不肯花钱
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爱拼才会赢
12楼2014-07-22 21:28:31
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金辉_萍

金虫 (小有名气)
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6楼: Originally posted by luwei13566 at 2014-07-21 17:43:08
电泳图是完全没有东西还是有杂带？模板是基因组？可以往pcr体系中加点DMSO终浓度为百分之5，模板稍微多加点，退火温度降3-5度先看看有无带再说

是反映体系的问题啊 我p了20来次昨晚上p出来了谢谢大家 万分感谢
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爱拼才会赢
13楼2014-07-22 21:28:46
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金辉_萍

金虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 刘芬玲 at 2014-07-21 20:46:07
可能是引物的问题，重新设计一对试试

是反映体系的问题啊 我p了20来次昨晚上p出来了谢谢大家 万分感谢
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爱拼才会赢
14楼2014-07-22 21:28:59
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金辉_萍

金虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by Crazyyzf at 2014-07-21 19:49:15
...

请文明点啊 大家都是经验积累啊 都没错  谢谢
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爱拼才会赢
15楼2014-07-22 21:29:53
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luwei13566

木虫 (正式写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by 金辉_萍 at 2014-07-22 21:28:46
是反映体系的问题啊 我p了20来次昨晚上p出来了谢谢大家 万分感谢...

是反应体系哪里出的问题，是不是加了后DMSO出来的？
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大家相互帮助哈
16楼2014-07-22 21:56:10
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Crazyyzf

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
15楼: Originally posted by 金辉_萍 at 2014-07-22 21:29:53
请文明点啊 大家都是经验积累啊 都没错  谢谢...

我在调侃师兄 没有不文明～

[ 发自小木虫客户端 ]
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17楼2014-07-22 23:52:36
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爨乡主人

木虫 (正式写手)
引物设计，还有引物的最合适的温度需要摸索。
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18楼2014-07-25 15:50:24
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金辉_萍

金虫 (小有名气)
引用回帖:
16楼: Originally posted by luwei13566 at 2014-07-22 21:56:10
是反应体系哪里出的问题，是不是加了后DMSO出来的？...

没有啊 我就退火温度时间一直在换
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爱拼才会赢
19楼2014-07-25 19:28:54
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金辉_萍

金虫 (小有名气)
引用回帖:
17楼: Originally posted by Crazyyzf at 2014-07-22 23:52:36
我在调侃师兄 没有不文明～
...

嗯
20楼2014-07-25 19:29:11
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