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金辉_萍

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by younghe at 2014-07-21 16:21:19
启动子是比较难扩的,多设计几对引物,用GC buffer扩增

是反映体系的问题啊 我p了20来次昨晚上p出来了谢谢大家 万分感谢
爱拼才会赢
11楼2014-07-22 21:28:01
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金辉_萍

金虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by primer022 at 2014-07-21 16:51:10
别pcr了,去全基因合成吧,也不贵,1ooo多吧。直接把你需要的片段克隆到载体上,当然你可以前后加上你需要的酶切位点

是反映体系的问题啊 我p了20来次昨晚上p出来了谢谢大家 万分感谢
想法是好的  不过老板不肯花钱
爱拼才会赢
12楼2014-07-22 21:28:31
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金辉_萍

金虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by luwei13566 at 2014-07-21 17:43:08
电泳图是完全没有东西还是有杂带?模板是基因组?可以往pcr体系中加点DMSO终浓度为百分之5,模板稍微多加点,退火温度降3-5度先看看有无带再说

是反映体系的问题啊 我p了20来次昨晚上p出来了谢谢大家 万分感谢
爱拼才会赢
13楼2014-07-22 21:28:46
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金辉_萍

金虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 刘芬玲 at 2014-07-21 20:46:07
可能是引物的问题,重新设计一对试试

是反映体系的问题啊 我p了20来次昨晚上p出来了谢谢大家 万分感谢
爱拼才会赢
14楼2014-07-22 21:28:59
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金辉_萍

金虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by Crazyyzf at 2014-07-21 19:49:15
...

请文明点啊 大家都是经验积累啊 都没错  谢谢
爱拼才会赢
15楼2014-07-22 21:29:53
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luwei13566

木虫 (正式写手)

引用回帖:
13楼: Originally posted by 金辉_萍 at 2014-07-22 21:28:46
是反映体系的问题啊 我p了20来次昨晚上p出来了谢谢大家 万分感谢...

是反应体系哪里出的问题,是不是加了后DMSO出来的?
大家相互帮助哈
16楼2014-07-22 21:56:10
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Crazyyzf

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
15楼: Originally posted by 金辉_萍 at 2014-07-22 21:29:53
请文明点啊 大家都是经验积累啊 都没错  谢谢...

我在调侃师兄 没有不文明~

[ 发自小木虫客户端 ]
17楼2014-07-22 23:52:36
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爨乡主人

木虫 (正式写手)

引物设计,还有引物的最合适的温度需要摸索。
18楼2014-07-25 15:50:24
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金辉_萍

金虫 (小有名气)

引用回帖:
16楼: Originally posted by luwei13566 at 2014-07-22 21:56:10
是反应体系哪里出的问题,是不是加了后DMSO出来的?...

没有啊 我就退火温度时间一直在换
爱拼才会赢
19楼2014-07-25 19:28:54
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金辉_萍

金虫 (小有名气)

引用回帖:
17楼: Originally posted by Crazyyzf at 2014-07-22 23:52:36
我在调侃师兄 没有不文明~
...

20楼2014-07-25 19:29:11
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