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xxh8372

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫微笑研究僧

引用回帖:
Originally posted by xxh8372 at 2008-4-4 16:41:

能否再请问,加溶液III 让质粒复性多长时间呢?

要是您有这个提取的很具体的步骤,能否给我,万分感谢!!!
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11楼2008-04-04 16:44:33
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lauren180

木虫 (著名写手)

小木虫挖井人


reasonspare(金币+1,VIP+0):积极交流奖
网上多得是,很成熟的。
细推物理须行乐。
12楼2008-04-04 16:45:35
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xxh8372

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫微笑研究僧

引用回帖:
Originally posted by lauren180 at 2008-4-4 16:45:
网上多得是,很成熟的。

好的,多谢关注!!!
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13楼2008-04-04 16:47:33
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linfeng196

至尊木虫 (正式写手)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来
我觉得有两种可能,一是细菌基因组的污染,解决的办法是加入溶液II的时候操作要轻柔,不要剧烈,还要控制时间,二可能是你的质粒的状态不好,如果你的质粒状态好的话,大多数应该以超螺旋形式存在,而你的都是线性的,没有超螺旋的,所以那个可能是开环状态的质粒,我觉得第二种可能性更大些
14楼2008-04-04 19:09:16
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linfeng196

至尊木虫 (正式写手)

对了,刚才我还忘记说了,就是你是从表达菌株DH5中提取的质粒,质粒在这种菌株中通常不会稳定存在,第三种可能是已经发生了质粒的整合
15楼2008-04-04 19:13:34
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bired

木虫 (著名写手)

减少上样量,在电泳
16楼2008-04-04 20:27:57
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xxh8372

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫微笑研究僧

引用回帖:
Originally posted by linfeng196 at 2008-4-4 19:09:
我觉得有两种可能,一是细菌基因组的污染,解决的办法是加入溶液II的时候操作要轻柔,不要剧烈,还要控制时间,二可能是你的质粒的状态不好,如果你的质粒状态好的话,大多数应该以超螺旋形式存在,而你的都是线性 ...

谢谢你的非常好的分析和建议!

我的质粒是以环状存在的
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17楼2008-04-04 21:26:04
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没事偷着乐

买个试剂盒提吧
18楼2008-04-05 10:26:09
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jerome711

银虫 (小有名气)

完全可以拿试剂盒做个对照看看,自己不想买借的用上一个就可以了
做懂得生活的人
19楼2008-04-05 10:33:52
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fengyan

木虫 (小有名气)

也可能是基因组DNA打断的片段吧
20楼2008-04-05 10:41:09
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