求助：质粒提取结果两条带是为什么 - 生物科学 - 第2页小木虫论坛-学术科研互动平台

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xxh8372

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Originally posted by xxh8372 at 2008-4-4 16:41:

能否再请问，加溶液III 让质粒复性多长时间呢？

要是您有这个提取的很具体的步骤，能否给我，万分感谢！！！

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11楼2008-04-04 16:44:33

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lauren180

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reasonspare(金币+1,VIP+0):积极交流奖

网上多得是，很成熟的。

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细推物理须行乐。

12楼2008-04-04 16:45:35

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xxh8372

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Originally posted by lauren180 at 2008-4-4 16:45:
网上多得是，很成熟的。

好的，多谢关注！！！

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13楼2008-04-04 16:47:33

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linfeng196

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我觉得有两种可能，一是细菌基因组的污染，解决的办法是加入溶液II的时候操作要轻柔，不要剧烈，还要控制时间，二可能是你的质粒的状态不好，如果你的质粒状态好的话，大多数应该以超螺旋形式存在，而你的都是线性的，没有超螺旋的，所以那个可能是开环状态的质粒，我觉得第二种可能性更大些

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14楼2008-04-04 19:09:16

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linfeng196

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对了，刚才我还忘记说了，就是你是从表达菌株DH5中提取的质粒，质粒在这种菌株中通常不会稳定存在，第三种可能是已经发生了质粒的整合

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15楼2008-04-04 19:13:34

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bired

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减少上样量，在电泳

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16楼2008-04-04 20:27:57

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xxh8372

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引用回帖:

Originally posted by linfeng196 at 2008-4-4 19:09:
我觉得有两种可能，一是细菌基因组的污染，解决的办法是加入溶液II的时候操作要轻柔，不要剧烈，还要控制时间，二可能是你的质粒的状态不好，如果你的质粒状态好的话，大多数应该以超螺旋形式存在，而你的都是线性 ...

谢谢你的非常好的分析和建议！

我的质粒是以环状存在的

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17楼2008-04-04 21:26:04

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