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meihuizhen

新虫 (初入文坛)

[求助] Bac to bac 昆虫转染

最近在做Bac  to  bac  杆状病毒表达,然后转到家蚕中,可是后来测酶活的时候,细胞上清液中没有(纤维素酶),而且注射的蚕发病的很少,我不知道原因出在哪一步,前面Bacmid  我都按照步骤做的啊,什么蓝白斑筛选,然后菌业PCr都是对的啊,结果测序也有目的片段的大小。转染是拿到外面做的,那个老师说可能质粒pfastbac有问题,但是我想有问题为什么还能进行转染的前期步骤
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伊森那

铁虫 (小有名气)

bactobac不是用昆虫细胞么,用家蚕能表达么,这个才是原因吧。
踏踏实实做好手边的事!
2楼2014-09-25 11:18:48
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李小同

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 伊森那 at 2014-09-25 11:18:48
bactobac不是用昆虫细胞么,用家蚕能表达么,这个才是原因吧。

家蚕也是昆虫好么!我们这边都做了一堆成功的蛋白了。
3楼2014-09-26 13:57:58
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myheat

铜虫 (小有名气)

病毒滴度不够,p1扩到p2试试

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2014-09-28 20:47:57
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