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zhongnan1991

铜虫 (初入文坛)

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[求助] 蛋白质的分离已有6人参与

小弟最近最做一个蛋白（一种酶）的纯化实验，目标蛋白的分子量约40KD，主要杂蛋白的分子量约为15KD,不知道用什么方法分离。
不知道透析能不能行？如果可行应该选孔径多大的透析袋？用超滤管可行吗？还有过柱子怎么样？
希望能够得到有这方面经验的师兄师姐或者老师的指点，万分期待，不胜感激！

[ Last edited by silicare on 2014-7-18 at 10:53 ]

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我发如华，是念何年；夜晴如镜，郎心似铁。

1楼2014-07-18 10:24:41

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zhongnan1991

铜虫 (初入文坛)

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引用回帖:

3楼: Originally posted by elise1987 at 2014-07-18 15:35:17
透析肯定是可行，透析袋25KD分子量的。超滤也可以，分子量控制在20KD以下，不然会漏。

嗯~ 可是用什么做透析液呢？我用三蒸水透析，一晚之后透析袋中溶液变得澄清并产生了很多黄色的粘连沉淀物。又换了PBS做透析液，感觉有一部分溶解了，溶液变的有点儿黄，不过还是有很多的沉淀。蛋白都沉积了，肯定会影响透析效果吧？(我用的透析袋是14KD的，因为手头只有这个，杂蛋白应该透不出来，就是想先试一下。结果就发现透析的过程中蛋白会沉积。这样还能用透析除杂蛋白吗？）