24小时热门版块排行榜    

查看: 1999  |  回复: 16
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

zhongnan1991

铜虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白质的分离 已有6人参与

小弟最近最做一个蛋白(一种酶)的纯化实验,目标蛋白的分子量约40KD,主要杂蛋白的分子量约为15KD,不知道用什么方法分离。
不知道透析能不能行?如果可行应该选孔径多大的透析袋?用超滤管可行吗? 还有过柱子怎么样?
希望能够得到有这方面经验的师兄师姐或者老师的指点,万分期待,不胜感激!

[ Last edited by silicare on 2014-7-18 at 10:53 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

我发如华,是念何年;夜晴如镜,郎心似铁。
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhongnan1991

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by songzuowei at 2014-07-18 10:28:06
你的目标蛋白带不带标签,比如若带His标签的话,过一下HIs柱不就可以了吗

这个蛋白是从植物中提取的天然蛋白,不是经过改造加工的。我还没试,不过感觉带HIS标签的概率不大吧?
我发如华,是念何年;夜晴如镜,郎心似铁。
4楼2014-07-23 08:18:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 17 个回答

songzuowei

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
yqbter: 金币+1, 鼓励发帖,欢迎常来生物科学版发帖! 2014-07-18 14:16:00
你的目标蛋白带不带标签,比如若带His标签的话,过一下HIs柱不就可以了吗
2楼2014-07-18 10:28:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

elise1987

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
透析肯定是可行,透析袋25KD分子量的。超滤也可以,分子量控制在20KD以下,不然会漏。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
不折腾,不胡闹,珍惜时间和生命
3楼2014-07-18 15:35:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhongnan1991

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by elise1987 at 2014-07-18 15:35:17
透析肯定是可行,透析袋25KD分子量的。超滤也可以,分子量控制在20KD以下,不然会漏。

嗯~  可是用什么做透析液呢?我用三蒸水透析,一晚之后透析袋中溶液变得澄清并产生了很多黄色的粘连沉淀物。又换了PBS做透析液,感觉有一部分溶解了,溶液变的有点儿黄,不过还是有很多的沉淀。蛋白都沉积了,肯定会影响透析效果吧?(我用的透析袋是14KD的,因为手头只有这个,杂蛋白应该透不出来,就是想先试一下。结果就发现透析的过程中蛋白会沉积。这样还能用透析除杂蛋白吗?)
我发如华,是念何年;夜晴如镜,郎心似铁。
5楼2014-07-23 08:35:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +22 Lanmanbaby 2026-08-09 36/1800 2026-08-12 22:50 by sdfapple719
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +8 majunge000 2026-08-10 9/450 2026-08-12 22:17 by 虫友是什么虫
[基金申请] filecode +13 documentary 2026-08-10 15/750 2026-08-12 15:56 by 云上清扬
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +7 布布和一二 2026-08-10 10/500 2026-08-12 09:12 by 布布和一二
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +3 majunge000 2026-08-11 4/200 2026-08-11 20:13 by lch2012
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 静等基金结果 +5 gjjjzhong 2026-08-10 16/800 2026-08-10 17:19 by Tide man
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] 大家散了吧,后缀研究没有意义,别浪费时间了,过好目前的每一天,不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
信息提示
请填处理意见