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青青草allan

银虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by piaoxue1216 at 2014-07-15 16:43:05
我是把基因的片段都扩出来了，包括中间片段，race5’和race3’，也设了引物，用的模板是测序返回来的质粒，但是就是拼接不上去，想问一下引物有什么要求吗，是片段两两加进去 还是三段片段一起加进去...

你得到的基因片段之间有重叠吗？
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爱出者爱返，福往者福来
11楼2014-07-23 16:07:02
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青青草allan

银虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by piaoxue1216 at 2014-07-23 16:04:12
是的，都得到了，各个片段之间也有重叠的，现在是有一些能拼接上去，但是会产生错配，跟之前扩出的片段有点不一样，甚至出现了移位，你们拼接是先用软件拼接，然后设引物，用cDNA扩出全长吗...

嗯，是的。
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爱出者爱返，福往者福来
12楼2014-07-23 16:08:20
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piaoxue1216

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
11楼: Originally posted by 青青草allan at 2014-07-23 16:07:02
你得到的基因片段之间有重叠吗？...

有重叠的。已经拼接好了，谢谢
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13楼2014-07-30 10:25:07
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青青草allan

银虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by piaoxue1216 at 2014-07-30 10:25:07
有重叠的。已经拼接好了，谢谢...

14楼2014-08-07 16:04:07
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