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厚德求是木虫 (著名写手)
Ph. D. Prof.
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[求助]
定点饱和突变方法求助 已有2人参与
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求助！ 问题正如题目所说，本人课题涉及蛋白质工程，目前为止由定点突变技术寻找到几个对正向突变点。现在希望对其进行定点饱和突变，以期找到更好突变效果。 但是实验室没有过有类似工作经历的人，所以想跪求各位有过类似试验经验的虫友指点一二，大概问题主要有： 1，如何设计引物，是否和定点突变引物设计类似，希望随机突变的碱基用什么来表示？ 2，PCR体系如何建立，关键是用什么酶？ 3，Protocol如何设置，退火温度是否要和引物的Tm相关联，退火和延伸时间分别是多少？ 兄弟真的是第一次做，如果问了无知问题还请大侠包含~ |
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6楼2015-07-11 10:45:13
厚德求是
木虫 (著名写手)
Ph. D. Prof.
- 应助: 41 (小学生)
- 金币: 2140.6
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- 帖子: 1210
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- 虫号: 2418606
- 注册: 2013-04-15
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
2楼2014-07-13 11:13:28
3楼2014-07-15 14:29:34
huangrui1988 
铜虫 (小有名气)
- 应助: 73 (初中生)
- 金币: 1727.8
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- 在线: 210.1小时
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- 注册: 2010-02-07
- 专业: 微生物资源与分类学
4楼2014-07-15 18:53:57
20