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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 体外转录求助！！
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tuodecai

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 体外转录求助！！ 已有3人参与

文献和产品说明书都说，带T7或SP6启动子的PCR
产物就可以做体外转录，但我试过很多次都失败了，不过我用线性化的质粒为模板是可以的！请帮忙分析下！谢谢！

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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1楼 2014-07-08 04:09:33
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惘人一月刀

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

PCR产物楼主表征过吗，确定序列是对的吗？如果序列对的话，转录的时间是多久？我之前也是PCR产物转录不出来，但是把转录时间延长到4h，就成功了。
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8楼2019-01-25 15:43:13
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hrjailjg

新虫 (初入文坛)
请问您的模板是怎么获得的？酶切切多少
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2楼2014-11-23 02:44:59
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tuodecai

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hrjailjg at 2014-11-23 02:44:59
请问您的模板是怎么获得的？酶切切多少

最好多切点，回收后浓度约1ug/ul.

[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼2014-11-23 08:20:39
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沉默的独角兽

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
tuodecai: 金币+1, ★有帮助, 谢谢回帖 2015-09-12 23:52:18
肯定要线性化吧，想想，如果不线性化就好像是在一直转啊转啊
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4楼2015-09-12 09:20:01
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