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tuodecai

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 体外转录求助!! 已有3人参与

文献和产品说明书都说,带T7或SP6启动子的PCR
产物就可以做体外转录,但我试过很多次都失败了,不过我用线性化的质粒为模板是可以的!请帮忙分析下!谢谢!

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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沉默的独角兽

金虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by tuodecai at 2015-09-12 23:56:49
其实我是想问为用PCR获得的DNA做体外转录怎么转不成功,理论上线性化质粒可以,PCR片段也应该可以的。咱帖子写得不太清楚,让你误解了我的问题。...

按道理来说是可以的,你回收后的浓度怎么确定的?我查查资料
6楼2015-09-13 11:38:16
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查看全部 8 个回答

hrjailjg

新虫 (初入文坛)

请问您的模板是怎么获得的?酶切切多少
2楼2014-11-23 02:44:59
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tuodecai

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by hrjailjg at 2014-11-23 02:44:59
请问您的模板是怎么获得的?酶切切多少

最好多切点,回收后浓度约1ug/ul.

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2014-11-23 08:20:39
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沉默的独角兽

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


tuodecai: 金币+1, 有帮助, 谢谢回帖 2015-09-12 23:52:18
肯定要线性化吧,想想,如果不线性化就好像是在一直转啊转啊
4楼2015-09-12 09:20:01
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