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jnzhaoxy

新虫 (初入文坛)

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[求助] 关于虾青素、β-胡萝卜素、番茄红素的HPLC分离已有6人参与

本人现在要做色素的HPLC鉴定，目前有虾青素、β-胡萝卜素、番茄红素的标样，柱子选用的是WATERS的symmentry C18（4.6*250mm）柱子或者Agilent 的Hypersil ODS c18（4.0*250mm）柱子。流动相选用二氯甲烷(A)和乙腈(B)，梯度洗脱。
梯度为       A          B
      0min 0          100
      20    50          50
      30    50       50
      31    0          100
      36    0    100
标样是用氯仿溶解。
我先用WATERS的跑的，结果连标样都完全跑不出来，而且有很多倒峰。。。
杯具啊，难道梯度有问题？时间不够？或者标样改用二氯甲烷溶可以避免倒峰么？
色素难跑，新手一枚，跪求指点！

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1楼 2014-07-03 16:56:51

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jnzhaoxy

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引用回帖:

4楼: Originally posted by xtcao668 at 2014-07-05 18:40:38
国标中检测方法的流动相和波长都和你的检测条件不符，http://www.cqagri.gov.cn/cqnk/detail.asp?pubID=85878&page=18国标中的方法。
具体还可以参考这篇文献
http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/j. ...

我主要目的是测虾青素的量，文献提到检测波长是475nm，故选用之。至于流动相，是老师之前跑虾青素时候自己摸索的，应该不会有什么问题吧