24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1881  |  回复: 12
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

hajierlove

管理员

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

[求助] 普通PCR遇到的问题,求助大神们 已有6人参与

扩全长基因,基因大小825bp。八个温度梯度(52.5-54),上下游引物Tm值分别为47.1、51.6、选用这个温度是因为之前梯度PCR未出来条带,在53度有杂带。图片如下,我应该怎么继续优化条件,虫虫们指导一下。谢谢啦

普通PCR遇到的问题,求助大神们
20140630-2_副本.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

踏实
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aini_222925

超级版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
hajierlove(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-07-03 12:22:15
这非特异也太严重了,换个酶试试看。
我是疯子我怕谁
5楼2014-07-02 17:21:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

hajierlove

管理员

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhangyunjing at 2014-07-02 13:51:01
应该是引物设计的不好,引物的Tm值太低。关于53℃有杂带的问题,有几个方面减少非特异性扩增,一方面采用热启动酶,另外可以添加一些PCR添加剂,如甜菜碱,DMSO等;还可以采用降落PCR的方法减少非特异性扩增。最好将 ...

扩全长,避免发夹结构,这个引物差不多只能这样啦。要不就出现发夹结构了
踏实
3楼2014-07-02 13:55:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

流氓一个

兑换贵宾

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

Tm值相差好几度 没问题么
我有我人生
4楼2014-07-02 16:49:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

博克侬浮码

管理员

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
hajierlove(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-07-03 12:22:22
升高温度试试吧,能降低非特异性带
6楼2014-07-02 18:19:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 311求调剂 +8 李芷新1 2026-03-31 8/400 2026-04-01 01:39 by 1018329917
[考研] 070300化学279求调剂 +9 哈哈哈^_^ 2026-03-31 11/550 2026-03-31 20:32 by sophie2180
[考研] 085602 307分 求调剂 +10 不知道叫什么! 2026-03-26 10/500 2026-03-31 19:53 by Dyhoer
[考研] 化学308分调剂 +11 你好明天你好 2026-03-30 12/600 2026-03-31 19:14 by 杨金金金
[考研] 070300一志愿211,312分求调剂院校 +12 小黄鸭宝 2026-03-30 12/600 2026-03-31 17:53 by 544594351
[考研] 086000调剂 +5 7901117076 2026-03-26 5/250 2026-03-31 17:45 by 544594351
[考研] 一志愿浙江大学工科动力工程370,数一121,专业课135,现在能去哪里 +3 080700调剂 2026-03-30 4/200 2026-03-31 12:00 by KLMY666
[考研] 08工科求调剂286 +5 tgs_001 2026-03-28 5/250 2026-03-31 08:18 by 一只好果子?
[考研] 一志愿食品科学与工程083200求调剂 +4 XQTJZ 2026-03-30 4/200 2026-03-31 04:10 by fmesaito
[考研] 抱歉 +3 田洪有 2026-03-30 3/150 2026-03-30 19:11 by 迷糊CCPs
[考研] 一志愿南开大学0710生物学359求调剂 +5 兔兔兔111223314 2026-03-29 7/350 2026-03-30 18:29 by 兔兔兔111223314
[考研] 324求调剂 +9 hanamiko 2026-03-26 11/550 2026-03-30 14:27 by JourneyLucky
[考研] 一志愿北京工业大学,324分求调剂 +6 零八# 2026-03-28 6/300 2026-03-29 21:20 by nanaliuyun
[考研] 343求调剂085601 +3 要努力学习x 2026-03-29 3/150 2026-03-29 18:35 by wxiongid
[考研] 327求调剂 +6 汲亦昊 2026-03-29 6/300 2026-03-29 13:40 by peike
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-03-27 6/300 2026-03-28 14:10 by 唐沐儿
[考研] 一志愿南京航空航天大学材料学硕求调剂 +3 @taotao 2026-03-28 3/150 2026-03-28 10:26 by JourneyLucky
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +4 崔wj 2026-03-26 4/200 2026-03-27 08:04 by chemisry
[考研] 一志愿 南京邮电大学 288分 材料考研 求调剂 +3 jl0720 2026-03-26 3/150 2026-03-26 13:39 by zzll406
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:03 by Ainin_
信息提示
请填处理意见