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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 生物制药 » PEI基因载体的MTT实验求助
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玉雪晴儿

银虫 (正式写手)

[求助] PEI基因载体的MTT实验求助 已有2人参与

最近在做以PEI为基质的基因载体的MTT实验，细胞系为Hela和293T，加药的浓度梯度为10、20、40、60微克/ml，理想的结果是在最高浓度（60微克/ml）时，细胞的存活率仍然在80%以上，但是我做了好几次，每次都是在浓度40微克/ml的时候细胞存活率突然下降（从浓度20微克/ml的90左右下降到70%以下），而阳性对照组PEI25 kDa却出现很好的存活率梯度，说明应该不是细胞铺板的问题，从聚合物的核磁氢谱来看，聚合物本省也没什么问题。现在不知道问题出在哪里，求助各位虫友，拜托各位了，多多指教！
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沿着既定的方向，前进
1楼 2014-07-01 11:48:01
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爷就这么拽

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
说明你那个东西本身就有毒性呗

[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼2014-07-01 12:22:34
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玉雪晴儿

银虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 爷就这么拽 at 2014-07-01 12:22:34
说明你那个东西本身就有毒性呗

为什么呢？这个东西的毒性主要是由于它的正电荷，但是从核磁氢谱图上看，正电荷的屏壁程度已经和文献上的查不多了，存活率不应该那么低的呀
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沿着既定的方向，前进
3楼2014-07-01 15:18:13
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nanopolymer

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
晴儿妹子 建议再对聚合物进行提纯处理 毒性不一定是有正电荷引起的 你的东东里面残余的小分子物质也可能会照成很大的生物毒性 祝你好远~
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自信不是相信自己强，而是相信自己会变强
4楼2014-07-02 17:09:51
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玉雪晴儿

银虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by nanopolymer at 2014-07-02 17:09:51
晴儿妹子 建议再对聚合物进行提纯处理 毒性不一定是有正电荷引起的 你的东东里面残余的小分子物质也可能会照成很大的生物毒性 祝你好远~

谢谢你的建议，可是这个聚合物合成之后是经过24小时蒸馏水透析的，所有小分子物质基本上都被透析掉了的。现在担心的是，在合成聚合物的过程中，会不会发生交联，就是借助小分子GDM（是我接在PEI上以提高渗透性的小分子物质，分子量228.4）将两个或者更多个的PEI连接到一起。我回想了一下合成的过程，基本上时间、温度都是按照实验方案来的，不应该会那样呀...
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沿着既定的方向，前进
5楼2014-07-02 17:27:13
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nanopolymer

至尊木虫 (知名作家)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 玉雪晴儿 at 2014-07-02 17:27:13
谢谢你的建议，可是这个聚合物合成之后是经过24小时蒸馏水透析的，所有小分子物质基本上都被透析掉了的。现在担心的是，在合成聚合物的过程中，会不会发生交联，就是借助小分子GDM（是我接在PEI上以提高渗透性的小 ...

透析要三天以上 即使是交联也能冻干的
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自信不是相信自己强，而是相信自己会变强
6楼2014-07-02 20:30:06
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玉雪晴儿

银虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by nanopolymer at 2014-07-02 20:30:06
透析要三天以上 即使是交联也能冻干的...

比较早的一些文献确实有说三天或以上的，但最近的文献都是24小时，这个合成我师姐做过，透析24小时，好着呢呀
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7楼2014-07-02 22:08:00
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