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动力小火车

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
红花: 1
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在线: 11小时
虫号: 2722325
注册: 2013-10-14
专业: 病原真菌、真菌感染与宿主

[求助] 酵母基因组提取已有2人参与

用玻璃珠震荡的方法提取酿酒酵母基因组，可是跑0.7%的DNA胶，1500一下的条带全都是弥散的，请教一下这最可能是哪步出了问题呢？还有就是，我提基因组的目的主要是为了将其作为模板，PCR获得目的片段。所以如果能够进行菌落PCR是最好的。尝试了直接挑取菌落溶于20ul双蒸水中，95度加热20min后取2ul作为模板。可是不行，想请教一下，怎样处理菌落更容易直接进行PCR呢？

酵母基因组提取

20140625.jpg

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1楼2014-06-28 09:27:15

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zhenhu

新虫 (初入文坛)

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金币: 2.5
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专业: 微生物生理与生物化学

★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-06-30 21:02:23

菌落PCR的话取0.2%的SDS 30ul于PCR管内，然后挑取单菌落于SDS中， 95°煮15分钟，-80°冻15分钟。重负2次，然后进行PCR，我们就用这方法，已经提出来了。

9楼2014-06-30 15:45:13

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