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赵晓楠zxn

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[求助] 阴性对照扩增出条带已有1人参与

做菌液PCR鉴定质粒是否转化进农杆菌。第一次PCR，由于循环数少，菌液出现目的条带较弱，阴性对照未出现条带。第二次PCR，增加了循环数，菌液和阴性对照都出现了目的条带。第三次PCR，菌液反而未出现目的条带，阴性对照却出现了目的条带。这是什么情况，解释不通啊。

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在学术的汪洋里，扑腾。

1楼 2014-06-27 15:39:28

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西门吹雪170

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【答案】应助回帖

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赵晓楠zxn: 金币+4, ★有帮助 2014-06-27 17:25:54
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-06-27 18:49:02
赵晓楠zxn: 金币+6 2014-06-29 10:50:54

你这个对照拿的是水作为模板吗？如果是的话污染的可能性比较大
另外，第三次没P出来可能跟你的操作有关，是否有什么东西忘加了？
最好的方法就是提取质粒进行PCR