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凤凰院_凶真

铜虫 (初入文坛)

[求助] 用荧光分光光度计测细胞内ROS的数据问题

在一无所知的情况下被老师拉来做癌细胞实验  
最近也要开始测癌细胞的ROS 用的染色剂是DHE (不是用试剂盒,自己用DMSO配的)
关于结果之前有看到一个文献说 荧光的强度和细胞的浓度是成正比关系的 所以为了获得准确结果 需要先测定细胞里面的蛋白质量 然后再用 荧光强度/每克蛋白质  的比值作为单位来处理数据的
我想请教一下各位用的是什么方法呢?
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haofeng0804

木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 凤凰院_凶真 at 2014-06-26 12:26:48
可是我们没有流式的仪器= =b那要怎么弄啊?
...

去别的实验室找个仪器,比你优化半天实验不来的容易
4楼2014-06-26 15:35:41
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haofeng0804

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
去做FACS吧,别把简单的实验搞麻烦了
2楼2014-06-26 08:42:09
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凤凰院_凶真

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by haofeng0804 at 2014-06-26 08:42:09
去做FACS吧,别把简单的实验搞麻烦了

可是我们没有流式的仪器= =b那要怎么弄啊?

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2014-06-26 12:26:48
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凤凰院_凶真

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by haofeng0804 at 2014-06-26 15:35:41
去别的实验室找个仪器,比你优化半天实验不来的容易...

主要就是我们学校没有实验室有这仪器 T_T
后面看的一种方法是说,先提前计算活细胞的数目,然后定好活细胞的量再做ROS的荧光检测。
我想询问的是,ROS的这个结果是荧光强度,最后数据处理是要怎么做呢?是看加药组和正常组荧光强度的差别倍数么?
5楼2014-06-29 23:59:16
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