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哈图萨斯90

铜虫 (初入文坛)

[求助] 分子克隆效率求助!!各种载体构建 已有4人参与

在做分子克隆方面的实验,无论使用传统的酶切酶连、同源重组或者Gateway的方法构建表达载体的时候,总是遇到某一段时间效率特别高,很快就能成功构建所需要的载体,但是某一段时间一点效率都没有的情况。一般来讲每年的2、3月份成功率比较高,其他时间段几乎可以说是完全失败的。这个问题已经困扰了我们很久了,实验室里的其他人也都遇到过。
希望大家多帮忙出出主意,最近很急!!!
谢谢了!!
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thaw

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

要求送酶的干冰运输,酶一定要埋在干冰里,我们实验室遇到过后来就好了
4楼2014-08-05 15:35:48
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seven拂晓

新虫 (初入文坛)

妈呀 我最近也在构建 卡在酶切上了 按你这么说我得明年才做的出来了。。。

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-06-23 09:09:44
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哈图萨斯90

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by seven拂晓 at 2014-06-23 09:09:44
妈呀 我最近也在构建 卡在酶切上了 按你这么说我得明年才做的出来了。。。

连续两年的经验啊~~
不同实验室可能会不一样吧
祝你顺利
3楼2014-06-23 16:36:26
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BioChen

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
哈图萨斯90(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-08-06 09:25:37
“一般来讲,每年的2-3月份比较高”
请问你在这个实验室待了几年?你是怎么得出这个看法的。
或许今年2-3月份你做载体构建的时候,效率很高。去年2-3月份你也在做载体构建?前年2-3月份你还在做载体构建?

我做实验有一个原则:当实验结果阴性,看阳性对照。
也就是当实验做不出来的时候,特别是应该做得来的实验,我会设置各种对照排除原因。
酶、感受肽、质粒提取、胶回收等都是可以设计实验验证它们是否好用的。
5楼2014-08-05 21:32:13
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