24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 2573  |  回复: 22
【悬赏金币】回答本帖问题,作者小冀-将赠送您 62 个金币

小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

引用回帖:
6楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-06-17 14:27:25
那个载体自连率是很高的,它不是都带有t的突出末端的。我都不买他们家的载体用,命中率不好
...

你是说可能是载体的问题吗?
···
11楼2014-06-18 09:45:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

引用回帖:
8楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-06-17 17:59:44
连接效率上去了,不做蓝白斑也行,我都是直接上氨苄板筛的
...

我也是氨苄平板筛的···
···
12楼2014-06-18 09:45:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
引用回帖:
10楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-06-18 09:33:20
我这边的阳性率已经接近100%,你觉得还有必要蓝白斑吗?
...

ok
13楼2014-06-18 09:58:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

忘记将来

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小冀-: 金币+2, 有帮助 2014-06-18 13:16:10
小冀-: 金币+1 2014-10-23 21:51:04
19T 自连 很正常,他质量 没那么好,建议4℃ 过夜,增加连接效率
14楼2014-06-18 10:07:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
小冀-: 金币+3 2014-10-30 12:15:45
引用回帖:
11楼: Originally posted by 小冀- at 2014-06-18 09:45:00
你是说可能是载体的问题吗?...

你可以考虑我说的那个t载体,价钱和你的19t只差几十块,最好是单独再配连接酶,建议用neb的

[ 发自小木虫客户端 ]
15楼2014-06-18 10:21:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
小冀-(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-06-18 10:43:35
小冀-: 金币+2 2014-06-18 13:15:57
引用回帖:
14楼: Originally posted by 忘记将来 at 2014-06-18 10:07:14
19T 自连 很正常,他质量 没那么好,建议4℃ 过夜,增加连接效率

连接效率和温度扯不上太大关系,关键是载体与外源片段的契合度以及分子比例

[ 发自小木虫客户端 ]
16楼2014-06-18 10:23:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小冀-(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-06-18 10:43:26
小冀-: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-10-23 21:51:24
我们实验室以前用的都是18t19t,可是后来怎么都不行了,实验做不出来,建议你用T-easy吧,很好很适用。
人生贵在行动,迟疑不决时,不妨先迈出小小一步。
17楼2014-06-18 10:24:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

draco1987

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小冀-: 金币+2, 有帮助 2014-06-18 13:15:16
商品化载体按理说应该是预先线性化的成品,老是出现自连有可能是载体Kit本身有问题吧?你要相信,Takara之流的商品质量绝对没你想象的好。换个批次的Kit试试吧,或者换个别的载体,反正你用的T载体也就用来克隆测序什么的,替代品多了去了。
18楼2014-06-18 11:59:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

draco1987

木虫 (正式写手)

引用回帖:
17楼: Originally posted by 飞约疯人院 at 2014-06-18 10:24:48
我们实验室以前用的都是18t19t,可是后来怎么都不行了,实验做不出来,建议你用T-easy吧,很好很适用。

Takara的T载体Kit阶段性抽风已经不是一两年了,习惯了吧,下个批次就好了,毕竟还是相对便宜好用。
19楼2014-06-18 12:02:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Echo熊熊

新虫 (初入文坛)

请问PMD19T的两个末端都是T末端如何自连呢?
20楼2015-01-21 18:23:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 小冀- 的主题更新
不应助 确定回帖应助 (注意:应助才可能被奖励,但不允许灌水,必须填写15个字符以上)
信息提示
请填处理意见